Cetrimid agarförnuft, beredning, användningsområden

1163
Sherman Hoover

De cetrimidagar o cetrimid är ett selektivt fast odlingsmedium, utformat för isolering av Pseudomonas aeruginosa. Den är baserad på att belysa produktionen av karakteristiska pigment av denna art och gjordes av modifieringen av Tech agar, skapad av King, Ward och Raney..

Den ursprungliga formeln innehöll salter av magnesiumklorid, kaliumsulfat, nedbrytning av gelatin i bukspottkörteln och agar-agar. Modifieringen av formeln bestod av tillsatsen av cetrimid (cetyltrimetylammoniumbromid) och glycerol.

Cetrimidagar sådd med Pseudomonas aeruginosa Källa: BiotechMichael [Public domain], från Wikimedia Commons

Cetrimidagar är användbart för mikrobiologisk studie av prover där närvaron av Pseudomonas aeruginosa. Det bör noteras att denna bakterie är av yttersta vikt, för även om den är en del av den normala miljömikrobioten beter sig den ofta som en opportunistisk patogen.

Därför är ett av de vanligaste problemen som orsakas av denna bakterie nosokomiella infektioner, det vill säga de som förekommer inom sjukhusmiljön och attackerar patienter som har ett deprimerat immunsystem.

Å andra sidan, på grund av affiniteten som denna mikroorganism har med fuktighet, är de mest utsatta föroreningsmålen: andningsutrustning, läkemedel, nebulisatorer, vattenkällor, luftkonditioneringsapparater, desinfektionsmedel, tvålösningar, injicerbara lösningar, öppna sår, katetrar, bland annat urinrör.

I denna mening är cetrimidagar användbart för att utföra mikrobiologiska kontroller och kulturer till de tidigare nämnda elementen..

Artikelindex

  • 1 Motivering
    • 1.1 Tolkning
  • 2 Förberedelse
  • 3 användningsområden
  • 4 Sådd
  • 5 Begränsningar
  • 6 Kvalitetskontroll
  • 7 Referenser

Grund

Cetrimidagar baseras på mediets förmåga att främja tillväxten av P. aeruginosa, stimulera produktionen av dess pigment och i sin tur hämma tillväxten av andra mikroorganismer.

Dessa egenskaper beror på funktionen hos var och en av dess komponenter. Den närvarande gelatinpeptonen fungerar som en källa till kväve, vitaminer och mineraler. Glycerol eller glycerin fungerar som en kolkälla.

För sin del är cetrimid (cetyltrimetylammoniumbromid) ämnet som hämmar tillväxten av andra bakterier än P. aeruginosa, inklusive andra arter som tillhör samma släkt.

Hämningen inträffar eftersom cetramid fungerar som ett katjoniskt rengöringsmedel och lyckas destabilisera plasmamembranet hos de flesta bakterier, förutom P. aeruginosa och några andra som lyckas överleva.

Å andra sidan innehåller den magnesiumklorid och kaliumsulfat. Dessa föreningar stimulerar fenotypiskt uttryck relaterat till förmågan att Pseudomonas aeruginosa för att producera olika pigment, inklusive: pyocyanin, pyoverdin, pyorrubin, pyomelanin och fluorescein. Slutligen innehåller den agar-agar, vilket ger den en solid konsistens.

Tolkning

Tolkningen av tillväxten som erhållits i denna agar utförs enligt följande:

Observation av runda, släta kolonier med regelbundna kanter, med produktion av blågröna, gröna, bruna eller rödaktiga pigment, plus utsläpp av fruktig lukt (aminoacetofenon), är ett förmodat resultat av närvaron av denna bakterie i nämnda prov..

Dessutom är det vägledande för P. aeruginosa observationen av ett ljust grön-gult pigment på kolonierna när plattan utsätts för ultraviolett ljus.

Fluorescens av P. aeruginosa-kolonier på cetrimidagar under ultraviolett ljus.

Det bör noteras att varje observerad färg beror på produktionen av ett specifikt pigment. Det blågröna pigmentet motsvarar produktionen av pyocyanin, det gröna till pyoverdin, det rödaktiga till pyorrubin, det bruna till pyomelanin och den ljusgultgröna fluorescensen under UV-ljus till fluorescein..

Förberedelse

Väg upp 43 g av det torkade mediet och lös upp i destillerat vatten. Tillsätt 10 ml glycerol. Ta blandningen till en värmekälla. Koka i några minuter tills den är helt upplöst.

Autoklav vid 121 ° C i 15 minuter. Låt stå och servera i sterila petriskålar när temperaturen är cirka 50 ° C.

Låt stelna, vänd upp, beställ i plack och håll i kylen tills den används. För att utsäda cetrimidagarplattorna måste de tas ut ur kylskåpet i förväg och får värmas till rumstemperatur..

Mediets slutliga pH måste vara 7,2 ± 0,2.

Färgen på det uttorkade mediet är beige och beredningen är ogenomskinlig vit.

Applikationer

På cetrimidagar kan alla typer av prover planteras där närvaron av Pseudomonas aeruginosa. Därför är det användbart inom alla områden inom mikrobiologi (miljö, industri, klinik, vatten och livsmedel)..

Det är mycket viktigt att analysera sjukhusmiljöer och därmed kunna tillämpa korrigerande åtgärder, eftersom denna mikroorganism når patienter genom förorenad utrustning, läkemedel, lösningar och förnödenheter som används av patienten.

På detta sätt kan mikroorganismen infektera nedre luftvägarna, urinvägarna och sår hos immunsupprimerade patienter..

Koloni räknas av P. aeruginosa i mikrobiella gränstester.

Sådd

Cetrimidagar kan användas som en primärodling. Plattan ympas på en av dess kanter och därifrån fördelas den genom utmattning till resten av plattan. Flytande prover kan ympas med en drigalski-spatel.

Plattorna inkuberades aerobt vid 37 ° C under 24 timmars inkubation.

Begränsningar

-En liten andel stammar av  Pseudomonas aeruginosas producerar inte pyocyanin, så ett falskt negativt kan tolkas.

-Några kliniskt viktiga Pseudomonas-arter hämmas i denna miljö.

-Trots att man observerar de egenskaper som beskrivs för Pseudomonas aeruginosa, de måste bekräftas med ytterligare bevis på identifiering. Ett test som inte bör missas är oxidastestet, det måste ge positivt.

-Vissa Enterobacteriaceae kan växa på detta medium och utveckla ett gult pigment, men det skiljer sig från Pseudomonas aeruginosa genom att när plattan utsätts för ultraviolett ljus finns det ingen fluorescens.

-Serratia marcescens lyckas utveckla och producerar ett rosa pigment.

-Om plattorna sådd med cetrimidagar utsätts för rumstemperatur en gång, kommer stammarna av P. aeruginosa de kan förlora fluorescensen som observeras under UV-ljus, men egenskapen återvinns om den återinkuberas vid 37 ° C.

QA

För att analysera den goda prestandan hos cetrimidagar kan kontrollstammar användas, såsom: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 och Staphylococcus aureus ATCC 25923.

De förväntade resultaten är:

  • För att P. aeruginosa bra tillväxt, med blågrönt pigment och positivt fluorescein.
  • S. maltophilia Y S. aureus hämmas delvis till helt.
  • Det förväntas att Escherichia coli hämmas helt.

Referenser

  1. Callicó A, Cedré B, Sifontes S, Torres V, Pino Y, Callís A, Esnard S. Fenotypisk och serologisk karakterisering av kliniska isolat av Pseudomonas aeruginosa. VacciMonitor. 2004; 13 (3): 1-9.
  2. Conda Pronadisa Laboratories. Cetrimid agarbas. 2014. Tillgänglig på: condalab.com
  3. Britannia Laboratories. Cetrimidagar. 2015.Tillgängligt på: britanialab.com
  4. BD Laboratories. BD Pseudoselagar (Cetrimidagar). 2013. Tillgänglig på: bd.com
  5. Laboratorio Francisco Soria Melguizo, C.A. Cetrimidagar. 2009. Tillgänglig på: http://f-soria.es

Ingen har kommenterat den här artikeln än.