Cary Blair Medium Rationale, Preparation and Uses

2794
Sherman Hoover

De halv Cary Blair är en halvfast agar som används för transport och konservering av biologiska prover som innehåller tarmpatogener, labila och anaeroba mikroorganismer. Liksom alla transportmedel är dess funktion att hålla provet i optimala förhållanden tills det odlas. De patogena mikroorganismer som finns, såväl som medföljande mikrobiota, måste förbli livskraftiga, men utan att öka deras befolkning..

Cary Blair Medium är resultatet av formuleringsändringen av Stuart Transport Medium. Modifieringen utfördes 1964 och bestod av att ersätta pH-regleringssystemet (glycerofosfat) med en oorganisk fosfatbuffert..

A. Culturette med Cary Blair Medium B. Palluppsamlare med Cary Blair Medium. Källa: A. Video Meganhow, få en sårkultur 2011 youtube.com B. Användare: Mattes [Public domain]

Omformuleringen var nödvändig eftersom dess skapare insåg att glycerofosfat efter en viss tid kunde metaboliseras av vissa saprofytiska bakterier. Dessa överlappar de närvarande patogenerna.

Andra förändringar var eliminering av metylenblått, samt en omjustering av pH mot alkalinitet (pH 8,4). Alla dessa förändringar förbättrade transportmedlets effektivitet.

Ursprungligen användes Cary Blair-mediet för underhåll av tarmpatogener, såsom Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae och Campylobacter sp.

Senare har emellertid effekten för att bevara livskraften hos krävande och labila patogena mikroorganismer sett, såsom: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae och några anaerober.

Artikelindex

  • 1 Motivering
  • 2 Förberedelse
  • 3 Använd
    • 3.1 Typ av prover
    • 3.2 Provsamling
    • 3.3 Identifiering av provet
    • 3.4 Överföring
  • 4 Undersökningar av transportmedlet Cary Blair
  • 5 Kvalitetskontroll
  • 6 Referenser

Grund

Cary Blair Medium innehåller natriumklorid, natriumtioglykolat, dinatriumfosfat, kalciumklorid och agar.

Natriumklorid bibehåller den osmotiska balansen i mediet, dinatriumfosfat och kalciumklorid balanserar pH. För sin del bibehåller natriumtioglykollat ​​en låg oxidationsreduktionspotential, medan den lilla delen av agar ger halvfast konsistens..

Cary Blair-medium innehåller inte näringsämnen, eftersom transportmediets funktion är att upprätthålla provet utan att det genomgår förändringar när det gäller fukt och mikrobiell belastning. det vill säga det undviker uttorkning av provet samtidigt som livskraften och mängden av de närvarande mikroorganismerna bevaras.

Slutligen förhindrar det lätt alkaliska pH mikroorganismernas död genom surhet, särskilt Vibrios är mycket känsliga för syror.

Förberedelse

Cary Blair media är kommersiellt tillgängligt som en speciell färdig att använda enhet. Transportsystemet täcks av en plastpåse av Peel Pack. Inuti den innehåller en pinne för att samla provet och behållarröret för Cary Blairs halvfasta medium..

Även på marknaden finns kommersiella hus som levererar det uttorkade mediet för beredning i laboratoriet..

För att göra detta, väga 13,2 g av det uttorkade mediet och lösa upp det i en liter destillerat vatten. Värm upp och skaka beredningen tills den är helt upplöst. Fördela mediet i provrör med skruvlock (bakelit).

Ånga rören i 15 minuter. Låt svalna och förvara vid rumstemperatur tills den används.

Oinokulerat Cary Blair-medium kan lagras optimalt i upp till 18 månader vid rumstemperatur.

Mediets pH måste justeras till 8,4 ± 0,2. Färgen på det beredda mediet är beige, med viss opalans.

Använda sig av

Typ av prover

Cary Blair Medium används när avföring, rektal pinne och vaginala pinnprover inte kan behandlas omedelbart.

När inget transportmedel är tillgängligt kan prover lagras vid -70 ° C.

Provtagning

Pinnen impregneras med provet och införs i Cary Blair-mediet utan att nå botten.

Providentifiering

Cary Blair-mediet måste ha en etikett i vilken grunduppgifterna placeras, såsom: patientens för- och efternamn, provets identifikationsnummer, provkällans källa, behandlande läkare, datum och tid för provtagningen. , förmodad diagnos, antibiotikabehandling.

Överföra

Tätt täckt och transporteras vid rumstemperatur för fekalproverFör vaginala prover på jakt efter anaeroba mikroorganismer rekommenderas att transportera proverna vid 4 ° C.

I alla fall är den rekommenderade överföringstiden 4-6 timmar, med högst 24 timmar..

Om närvaron av Campylobacter jejuni i avföringsprover och dessa kan inte bearbetas inom 24 timmar rekommenderas lagring i Cary Blair-medium vid 4 ° C.

Forskning på Cary Blair transportmedel

Flera studier har visat att Cary Blair-medium kan förbli livskraftigt för enteropatogena mikroorganismer av släktet Shigella och Salmonella i upp till 49 dagar efter att provet tagits..

För hans del, Vibrio cholerae, en annan viktig tarmpatogen, kan överleva i 22 dagar, medan Yersinia pestis (orsakande medel för bubonisk och lungpest) kan återvinnas efter 75 dagar.

Trots den påvisade hållbarheten när det gäller återvinningen av dessa mikroorganismer rekommenderas dock att de tagna proverna transporteras i Cary Blair-mediet till laboratoriet så snabbt som möjligt..

På samma sätt, när provet når laboratoriet, måste det sås utan dröjsmål i respektive odlingsmedium..

Å andra sidan rekommenderas Cary Blair-mediet förutom att vara användbart för transport av fakultativa mikroorganismer också för prover som innehåller anaeroba patogener..

I denna mening genomförde DeMarco och medarbetare 2017 en studie med titeln: Överlevnad av vaginala mikroorganismer i tre kommersiellt tillgängliga transportsystem.

De visade att Cary Blair Transport Medium är det bästa transportmediet för bevarande och återhämtning av vaginala anaeroba mikroorganismer. På samma sätt visade de att den högsta återvinningsgraden uppnåddes när överföringstemperaturen var 4 ° C..

Därför dras slutsatsen att transporttemperaturen för vaginala vattpinnor (anaeroba mikroorganismer) bör vara vid 4 ° C. Medan för fekala prover som letar efter fakultativa mikroorganismer är den ideala temperaturen rumstemperatur..

QA

Stammar som kallas Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis  ATCC 14028, Vibrio cholerae Y Campylobacter sp.

Mediet ympas med den valda stammen och hålls vid rumstemperatur i 24 timmar. De sås sedan i motsvarande kulturmedia. I samtliga fall förväntas en tillfredsställande återhämtning av mikroorganismen i fråga..

Referenser

  1. DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN, et al. Överlevnad av vaginala mikroorganismer i tre kommersiellt tillgängliga transportsystem. Anaerob. 2017; 45: 44-49.
  2. Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. Jämförelse av konserveringsmedia för lagring av avföringsprover. J Clin Microbiol. nittonhundranittiofem; 33 (8): 2176-2178.
  3. Dan M, Richardson J, Miliotis MD, Koornhof HJ. Jämförelse av konserveringsmedier och frysförhållanden för förvaring av avföring. J Med Microbiol. 1989; 28 (2): 151-4.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnos. 5: e upplagan Redaktionellt Panamericana S.A. Argentina.
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnos. 12 utgåva Redaktionellt Panamericana S.A. Argentina.
  6. Conda Pronadisa Laboratories. Half Cary Blair. Finns på: condalab.com
  7. Metrix-laboratoriet. Cary Blair. Finns på: metrixlab.mx

Ingen har kommenterat den här artikeln än.