BHI agar foundation, beredning och användningsområden

4722
Egbert Haynes

De BHI agar Hjärnhjärtinfusionsagar är ett fast näringsrikt odlingsmedium. På spanska hänvisar vi till det som hjärninfusionsagar. Det är ett icke-selektivt odlingsmedium, vilket innebär att alla typer av grampositiva och gramnegativa bakterier kan utvecklas, liksom vissa jäst och trådformiga svampar..

Den består av en infusion av nötkreaturs hjärna och hjärta, peptiskt hydrolysat från djurvävnader, bukspottskörtelhydrolysat av kasein, natriumklorid, glukos, dinatriumfosfat och agar..

BHI-plattor. Källa: Foto taget av författaren MSc. Marielsa gil.

Det bör noteras att BHI-agar är ett av de mest använda odlingsmedierna i bakteriologilaboratorier. Kan användas utan kosttillskott som primärodling, subkultur av kolonier erhållna på andra selektiva medier eller för underhåll av stammar i laboratoriet.

Å andra sidan är det ett idealt medium att användas som bas vid beredningen av anrikat media, såsom blodagar och chokladagar. Båda idealiska för att isolera krävande mikroorganismer ur näringssynpunkt. Det bör dock noteras att eftersom det innehåller glukos är det inte lämpligt för att observera hemolysmönster..

På samma sätt kan BHI-agar användas för beredning av specialmedier för isolering av svårväxande patogena mikroorganismer i vanliga medier, inklusive: Haemophilus sp, Francisella tularensis, Corynebacterium diphtheriae och Histoplasma capsulatum.

Med antibiotikatillsatsen blir BHI-agar ett selektivt medium för isolering av svampar.

Artikelindex

  • 1 Motivering
  • 2 Förberedelse
    • 2.1 Kilar
    • 2.2 Tallrikar
    • 2.3 Beredning av blodagar
  • 3 användningsområden
    • 3.1 Användning utan kosttillskott
    • 3.2 Som basagar för beredning av andra medier
  • 4 Kvalitetskontroll
  • 5 Referenser

Grund

Det är ett näringsrikt odlingsmedium för att isolera måttligt krävande mikroorganismer, och dess anrikning kan ökas med tillsats av blod och andra näringstillskott..

Det är ett icke-selektivt odlingsmedium, därför tillåter det tillväxt av de flesta Gram-positiva och Gram-negativa bakterierna, liksom vissa svampar. Det kan dock bli selektivt med tillsats av antibiotika..

Mediet innehåller infusion av hjärna och hjärta av nötkreatur, peptiskt hydrolysat från djurvävnad och kaseinhydrolysat i bukspottkörteln; alla dessa föreningar fungerar som källor till vitaminer, aminosyror, kväve och kol.

Glukos är ett kolhydrat som ger energi till mikroorganismer när de har jäst det. Under tiden upprätthåller natriumklorid och dinatriumfosfat osmotisk balans och ger ett pH nära neutralitet. Slutligen ger agaren mediet en solid konsistens.

Förberedelse

Väg 52 gram av det uttorkade mediet och lös det i en liter destillerat vatten. Ta blandningen till en värmekälla tills den kokar, rör om ofta under upplösningsprocessen..

BHI-agarplattor eller kilar kan framställas utan tillsatser.

Kilar

För beredning av kilar, servera beredningen tills hälften av varje rör är fylld, täck och sterilisera i en autoklav vid 121 ° C i 15 minuter, när du lämnar, lägg på en bas tills de stelnar. Förvara senare i kylen tills den används.

BHI-kilar för bakterioteca. Källa: Foto taget av författaren MSc. Marielsa gil.

Tallrikar

Den upplösta blandningen autoklaveras vid 121 ° C i 15 minuter, när den lämnas får den svalna till 50 ° C och 20 ml av mediet serveras i sterila petriskålar. De får stelna, inverteras och förvaras i kylskåp tills de används. Låt plattorna komma till rumstemperatur innan sådd.

Mediets pH måste förbli vid 7,4 ± 0,2.

Oförberett medium är beige i färg och berett är ljus bärnstensfärgat.

Beredning av blodagar

Efter sterilisering av mediet, svalna till en temperatur av cirka 45 till 50 ° C, tillsätt sedan blodet (50 ml), blanda försiktigt för att homogenisera och servera aseptiskt 20 ml i varje petriskål. Om bubblor bildas på plattan måste den lättare lågan snabbt föras över bubblorna för att eliminera dem.

På samma sätt kan specialmedia framställas genom att tillsätta motsvarande tillsatser när blandningen når en temperatur av 45 till 50 ° C..

Mitten är körsbärsröd.

Applikationer

Använd utan kosttillskott

BHI-agar utan tillsatser är användbar som en primärodling och för sådd av rena stammar av små eller medelstora mikroorganismer för deras efterföljande identifiering..

Eftersom det är ett ljusfärgat medium är det idealiskt för att observera pigment och eftersom det inte innehåller störande ämnen kan vissa biokemiska tester, såsom oxidas och katalas, utföras på det, eller andra biokemiska tester kan monteras från kolonier från denna agar.

På samma sätt används BHI-agarkilar i stor utsträckning för underhåll av stammar under en viss tid i laboratoriet (bacterioteca).

De yta-ympade plattorna eller kilarna med bakteriestammar inkuberas vid 37 ° C under 24 till 48 timmar. I svampar beror temperaturen och inkubationstiden på vilken typ av svamp som eftersträvas..

Som basagar för beredning av andra medier

Med denna bas kan du förbereda anrikade och selektiva medier.

Berikad

Dess huvudsakliga funktion är att tjäna som bas vid beredningen av blodagar för rutinmässig användning i mikrobiologilaboratorier. Särskilt BHI-basen bidrar till isoleringen av stammar av Streptococcus sp. Den har emellertid nackdelen att den inte är lämplig för observation av hemolysmönster eftersom den innehåller glukos..

Det används också vid beredning av kanin eller hästblodagar för isolering av Haemophilus sp. För bättre resultat kan ett anrikningstillägg (IsoVitaleX) läggas till.

Om proverna kommer från luftvägarna till agaren kan bacitracin tillsättas för att hämma den medföljande floran och öka sannolikheten för återhämtning av stammarna av Haemophilus sp.

Å andra sidan kan blodagar (lamm eller människa) med cystintellurit beredas att isoleras Corynebacterium diphtheriae. Likaså är det användbart att bereda kaninblodagar med tillsats av cystin och glukos för isolering av Francisella tularensis.

Blodagarplattorna sås genom utmattning och de inkuberas vid 35-37 ° C under 24-48 timmar i mikroaerofilicitet (5-10% COtvå).

Selektiv

Detta medium med tillsats av antibiotika kan ersätta Sabouraud-agar för isolering av svampar..

Kombinationen av BHI-agar med kloramfenikol - gentamicin eller penicillin -, streptomycin och hästblod är perfekt för isolering av Histoplasma capsulatum.

Beroende på mikroorganismen som ska isoleras rekommenderas inkubation vid 35-37 ° C eller vid rumstemperatur i aerobios. Ibland är inkubation nödvändig i båda temperaturområdena, med två plattor för detta..

Några svampar gillar Trichophyton mentagrophytes ska inkuberas vid rumstemperatur i upp till 7 dagar.

QA

Från varje beredd sats rekommenderas att man inkuberar en platta eller kil vid 37 ° C i 24 timmar och verifierar att det inte finns någon tillväxt. särskilt viktigt vid beredning av blodagar, eftersom det är ett lätt förorenat medium.

Å andra sidan kan mediets kvalitet utvärderas genom att inokulera kända eller certifierade standardstammar och observera deras utveckling..

I denna mening att utvärdera BHI-agar utan tillsatser, stammar av Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923 eller Candida albicans ATCC 10231. Inkubera vid 37 ° C i aerobios under 24 till 48 timmar. Tillfredsställande tillväxt förväntas i alla fall.

För att utvärdera blodagarplattor, stammar av  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 eller Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533.

Bakteriestammar inkuberas vid 37 ° C i mikroaerofilitet i 24 timmar, medan svampen inkuberas vid rumstemperatur i en fuktig kammare i upp till 7 dagar. Tillfredsställande tillväxt förväntas i alla fall.

Referenser

  1. Britannia Laboratories. Hjärnhjärtinfusionsagar. 2015.Tillgängligt på: britanialab.com.
  2. BD Laboratories. Hjärthjärtinfusion (BHI) Agar. 2013. Tillgänglig på: bd.com.
  3. Laboratorios Difco Francisco Soria Melguizo, S.A. Hjärnhjärtinfusionsagar. 2009.
  4. Neogen-laboratoriet. Hjärnhjärtinfusionsagar. Finns på: foodsafety.neogen.com
  5. Gil M. Blodagar: grund, användningar och beredning. 2018. Tillgänglig på: lifeder.com.
  6. Wikipedia-bidragsgivare. Hjärninfusion. Wikipedia, den fria encyklopedin. 19 september 2018, 03:58 UTC. Tillgänglig på: wikipedia.org. Åtkomst 2 mars 2019.
  7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnos. 12 utgåva Redaktionellt Panamericana S.A. Argentina.

Ingen har kommenterat den här artikeln än.