De isolering av mikroorganismer involverar en uppsättning tekniker som används för att extrahera och separera arterna av intressanta mikrober från deras naturliga livsmiljö till en livsmiljö in vitro. Dessa tekniker är en uppsättning av många grundläggande och nödvändiga verktyg för mikrobiologiska studier..
De flesta av de mikroorganismer som är kända och som har definierats av vetenskapen är de som har kunnat isoleras och förvaras i behållare som delvis simulerar de inneboende förhållandena på de platser där de bor..
Kanske en av de första män som övade isoleringen av mikroorganismer var Anton Van Leeuwenhoek (1632-1723), som samlade och isolerade prover av mikrober från ett stort antal platser och ekosystem för att observera dem noggrant under de hundratals mikroskop som han designade..
Det var dock inte förrän forskarna Louis Pasteur och Robert Koch under 1800-talet började genomföras strikta metoder som tjänade till att isolera specifika mikroorganismer, allt för att kunna studera dem i detalj..
Till skillnad från Leeuwenhoek fokuserade dessa forskare på att isolera definierade arter från de andra mikroberna i miljön. Dessutom var de intresserade av att hålla dem vid liv så länge som möjligt utanför deras naturliga miljö..
För närvarande har exakta tekniker utvecklats för isolering och tillväxt av många olika mikroorganismer erhållna från nästan vilken miljö som helst på biosfären..
Artikelindex
Alla mikroorganismisolationer börjar med att samla ett prov i naturen där mikroorganismerna av intresse finns. Dessa platser kan vara sår i djur- eller växtvävnader, jord eller substrat, pölar, hav, ytor som hud etc..
Provtagningen utförs genom att vidröra eller stödja en behållare som har ett medium med lämpliga krav för tillväxt av mikroorganismer på ytan från vilken man önskar isolera. I den här behållaren kommer du att få så kallad ”mikrokultur”..
Generellt sett är den första grödan som erhålls från naturliga livsmiljöer utan tvekan en "blandad skörd", det vill säga den består av ett stort antal olika arter av mikrober..
De flesta arter av mikroorganismer kan emellertid isoleras från varandra i laboratoriet, i syfte att erhålla mikroorganismkulturer där endast arten av intresse växer eller, med andra ord, erhålla "rena kulturer".
I huvudsak är processen som utförs för att erhålla "rena kulturer" det som kallas "isolering av mikroorganismer".
Det finns ett stort antal tekniker för isolering av mikroorganismer, och det finns till och med några specifika för en viss typ av mikroorganism i synnerhet. I andra fall är det möjligt att få en ren kultur endast genom att samla provet från den naturliga miljön..
Bland de isoleringstekniker som används mest för att separera en art av intresse som finns i blandade odlingsmedier är:
Kanske är detta den mest använda metoden för att isolera mikroorganismer. Denna teknik består av att framställa ett sterilt fast medium med alla näringsämnen som är nödvändiga för tillväxten av mikroorganismen i en glasbehållare, såsom en petriskål..
Med hjälp av ett fint, i allmänhet spetsigt instrument berörs mikroorganismen som ska isoleras i den blandade kulturen, och sedan, i det sterila fasta mediet, börjar spetsen på instrumentet med vilken mikroorganismen berördes glida från sida till sida genom hela registreringsskylt.
Detta görs intensivt fram och tillbaka över ytan av det fasta eller agariserade mediet, som om det vore en sicksack. Detta görs vanligtvis tills ungefär en tredjedel av diametern på agaren på plattan är täckt..
För denna metod utförs en utspädning av mediet där de uppsamlade mikroberna lever till den punkt där endast några hundra celler återstår för varje milliliter av mediet där de späddes ut..
Från denna utspädning tas några milliliter och blandas med mediet som kommer att tillsättas i behållaren innan den stelnar. När en blandning görs mellan det agariserade mediet och det flytande mediet där mikroorganismerna är förblir de nedsänkta i mediet och är bara synliga tills de sprider sig i form av en koloni..
När de utvecklas som en koloni blir det lättare att separera dem från resten av mikroorganismer med andra metoder som repor, till exempel.
Denna metod består av att göra serieutspädningar av mediet där mikroorganismerna finns. Ett exempel på detta är de utspädningar som görs för att rena Lactococcus lactis eller Lactobacillus acidophilus, bakterier som ansvarar för produktionen av ost och yoghurt.
Cirka 1 ml tas från ett rör som innehåller surmjölk eller tidigare jäst yoghurt och denna milliliter ympas i steril mjölk utan mikroorganismer. Senare tas ungefär en milliliter av mjölken och processen upprepas.
Detta upprepas ungefär tre eller fyra gånger i rad, vilket sannolikt kommer att uppnås Lactococcus lactis eller Lactobacillus acidophilus i ett medium isolerat från föroreningar som kan representera andra mikrober.
Denna metod uppnås genom att odla mikroorganismerna i odlingsmedier med förhållanden som stimulerar eller underlättar tillväxten av arten av intresse och i många fall under förhållanden som hämmar tillväxten av andra förorenande mikroorganismer..
Bakterier av släktet Salmonella De växer i odlingsmedier berikade med selenit, eftersom dessa mikroorganismer omvandlar selenit till selen för att metabolisera det. Seleniten i mediet gör det svårt att assimilera näringsämnena för andra mikroorganismer än salmonella..
Kanske är detta den svåraste och minst effektiva tekniken för att isolera mikrober. Det handlar om att placera en droppe av mediet (provet) där mikroorganismerna är inrymda på ett sterilt täckglas och sedan placera det på mikroskopstadiet..
Senare under observationen avlägsnas en enda cell med hjälp av en steril mikropipett. Droppen placeras på ett annat sterilt täckglas som inkuberas vid lämplig temperatur för mikroorganismen. Slutligen observeras det igen under mikroskopet för att visa tillväxten.
Om nya celler har utvecklats från den enskilda cellen som tagits vid ny observation läggs de till ett sterilt odlingsmedium för att erhålla en helt isolerad ren kultur..
Det finns otaliga olika mikrober på planeten Jorden som är utspridda i nästan alla kända ekosystem. Vissa mikroorganismer är kända som Extremophiles och kräver unika förhållanden för deras utveckling och tillväxt..
Dessa extrema förhållanden är både fördelaktiga och ofördelaktiga för isolering, eftersom de, även om de endast tillåter tillväxt av dessa mikroorganismer, kan vara svåra att återskapa in vitro.
Isoleringen av mikroorganismer har representerat en av de viktigaste framstegen inom området vetenskap och medicin. Detta har gjort det möjligt för mänskligheten att studera och utveckla effektiva behandlingar mot olika mikrobiella patogener..
För närvarande är det säkert känt att mikroorganismer utgör en väsentlig del av alla ekosystem, så att uppnå isoleringen av vissa av dem med relativ betydelse för människan gör det möjligt för forskare att studera dem intensivt för att förstå djupet dess roll i varje ekosystem.
Ingen har kommenterat den här artikeln än.