Laktofenolblå egenskaper, sammansättning, beredning, användningsområden

2223
Charles McCarthy

De laktofenolblått eller bomullsblått är ett preparat med enkla färgningsegenskaper. Den används i kliniska laboratorier för att färga svampstrukturer som hyfer, groddar och sporer..

Det hjälper till vid förmodad eller preliminär diagnos av vissa svampar, men det är alltid tillrådligt att förstärka diagnosen med mer specifika tester, såsom biokemiska eller serologiska tester..

Grafisk framställning av laktofenolblå fläck, smet färgad med laktofenolblått, mikroskopmonterat preparat. Källa: public Domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8

Laktofenolblått består av mjölksyra, anilinblått, glycerol, fenol och avjoniserat vatten. Det kan beredas i laboratoriet eller det kan köpas färdigt att använda. När den är beredd är den färdig att användas, den får under inga omständigheter spädas ut, eftersom denna åtgärd ger fruktansvärda resultat.

Koncentrationen av dess komponenter gör den idealisk för färgning av svampstrukturer, eftersom fenol eliminerar den medföljande bakteriemikrobioten, medan mjölksyra genererar en skyddande film runt svampstrukturen. Slutligen har anilinblått en affinitet att vidhäfta till svampens strukturer..

Artikelindex

  • 1 Motivering
  • 2 funktioner
  • 3 Sammansättning
  • 4 Använd
  • 5 Förfarande
    • 5.1 Färgning av svampstrukturer i kulturer
    • 5.2 Färgning av direkta biologiska prover
    • 5.3 Färg av könsrör vid identifiering av Candida albicans
  • 6 Säkerhetsdatablad för laktofenol
    • 6.1 Hälsa
    • 6.2 Brandfarlighet
    • 6.3 Instabilitet
    • 6.4 Särskilda faror
  • 7 Referenser

Grund

Med laktofenolblått utförs en enkel färgning av svampstrukturerna i en viss mykologisk kultur. Det kallas enkelt eftersom det bara använder ett färgämne.

Laktofenolblått, förutom färgning, fungerar också som en klargörare av provet, tack vare den gemensamma verkan av mjölksyra och fenol, dessutom fungerar fenol som en mordant och samtidigt förhindrar lyset av mikroorganismen genom att hämma hydrolysen enzymer som kan vara närvarande.

Medan mjölksyra bevarar morfologin hos svampens strukturer.

Å andra sidan har anilinblått egenskapen att vidhäfta eller binda till kitininnehållande strukturer. Strukturer fläckar ljusblått.

Det bör noteras att cellväggen hos svampmikroorganismer, särskilt mögel, innehåller kitin, varför detta färgämne är perfekt för färgning av dessa mikroorganismer..

Egenskaper

Laktofenolblå lösning är en lätt grumlig, lätt grumlig, vattenhaltig färg, starkt sur, ljusblå. Den förblir stabil om den förvaras mellan 15 ° C och 25 ° C. Flaskan måste hållas ordentligt stängd. Det är irriterande och frätande för hud och slemhinnor.

Sammansättning

Formeln för att bereda en liter laktofenolblått är som följer:

-250 g / 1 mjölksyra

-1,0 g / L anilinblått eller metylblått

-500 g / 1 glycerin

-250 g / 1 fenol

-250 ml avjoniserat eller destillerat vatten.

Fenolen löses i det tidigare uppvärmda vattnet. Mjölksyra och glycerin tillsätts och blandas mycket bra. Slutligen löser sig anilinblått. Blandas igen och är redo att användas.

Portionerna för att bereda 80 ml laktofenolblå lösning är:

-20 g fenolkristaller

-20 ml mjölksyra

-40 ml glycerol eller glycerol

-20 ml destillerat vatten.

Använda sig av

Det används för att fläcka svampstrukturer och, genom de morfologiska egenskaper som observerats på mikroskopisk nivå, för att kunna göra en presumtiv diagnos av svampen.

Bearbeta

Färgning av svampstrukturer i kulturer

- En ren kultur av svampen tas från vilken du vill observera dess strukturer.

- Det är att föredra att arbeta i en laminär fläktkåpa eller under tändaren med en mask och handskar, eftersom det är nödvändigt att följa biosäkerhetsstandarder, eftersom de flesta mögel är lätta att sprida i miljön och därför utgör en fara för operatören.

- En droppe laktofenolblått placeras på en bild..

- Ett litet kvadrat med tejp av god kvalitet skärs och fästs noggrant på slutet av platinahandtaget, redan steriliserat och kallt..

- Platinahandtaget närmar sig den mest ytliga delen av svampkolonin och kulturen berörs mycket noggrant, exakt där tejpen finns..

- Det tas sedan till bilden och placeras strax över droppen laktofenolblått, var noga med att tejpen förlängs perfekt och smörjs med färgämnet. Platinahandtaget är mycket ömtåligt borttaget.

- Ytterligare en droppe laktofenolblått placeras på tejpen och ett täckglas ovanpå. Använd inte för mycket tryck för att undvika att förstöra svampens strukturer, eftersom dessa är extremt ömtåliga. Färgen bör tillåtas verka i cirka 3 till 4 minuter.

- Efter denna tid är beredningen redo att observeras under ett mikroskop i 10X eller 40X förstoring. Om det krävs observation vid 100X, använd nedsänkningsolja.

- Svampens strukturer är i allmänhet färgade blåa, med undantag för dematiaceous svampar som kommer att behålla sin karakteristiska bruna färg av denna typ av svamp..

Direkt biologisk provfärgning

Om det krävs att studera ett direkt biologiskt prov, såsom sputum, pus, exsudat, utsöndringar, bland annat, måste dessa ha en tidigare procedur för dekontaminering av provet. NaOH-lösning används för detta.

Vid hårprover kan dessa färgas direkt.

Flera drabbade hårstrån (totalt 10) tas från de förmodade tinea capitis-lesionerna (alopeciska områden) och placeras på ett objektglas (3 till 4 hårstrån per objektglas). Några droppar laktofenolblått placeras ovanpå och omedelbart täckta med ett täckglas..

Ta tag i bilden med tången och värm försiktigt över en brännare. För att göra detta gör du tre till fyra snabba passeringar genom lågan. Observera mikroskopet vid 40X och leta efter sporer utanför eller inuti håret (ektotrix respektive endotrix). Tillsätt nedsänkningsolja vid behov och observera vid 100X.

Bakteriefärgning vid identifiering av Candida albicans

Efter inkubering av den förmodade kulturen i Candida albicans i humant serum i 2 till 4 timmar vid 37 ° C, ta en del av lösningen och fläck med laktofenolblått. Beredningen observeras under mikroskop vid 40X. Kimröret är närvarande och blastosporerna fläckar ljusblå.

Laktofenolsäkerhetsdatablad

National Fire Protection Association (NFPA) upprättar säkerhetsdatablad för kemiska ämnen i termer av risken att det representerar enligt olika aspekter, dessa symboliseras av en färgad romb och ett tal som sträcker sig från 0-4.

Hälsofaror identifieras i blått, brännbarhet i rött, instabilitet eller reaktivitet i gult och varje speciell fara i vitt..

Hälsa

Hälsorisken som laktofenolblått utgör enligt NFPA är nivå 3. Detta innebär att ämnet är extremt farligt vid intag eller i direkt kontakt med hud eller slemhinnor..

Det är ett mycket frätande och irriterande ämne.

Vid kontakt med hud och slemhinnor orsakar det svåra brännskador.

Om det intas kan det orsaka huvudvärk, förvirring, slöhet, medvetslöshet, andningsstopp och till och med dödsfall..

Eldfarlighet

Enligt NFPA är Lactophenol Blue rankat som nivå 1 för antändlighet. Detta innebär att den bara brinner om den värms upp över 94 ° C..

Instabilitet

Listad under NFPA på nivå 0 (noll) för reaktivitet. Detta innebär att det inte har någon risk för reaktivitet, det vill säga det är ett kemiskt stabilt ämne..

Särskilda faror

Erbjuder inga ytterligare speciella faror.

Referenser

  1. SAR-laboratorium. Laktofenolblått. 2010. Tillgänglig på: labsar.com.
  2. Tillämpat laboratorium för klinisk kemi. Laktofenolblått. 2015.Tillgänglig på: cromakit.es
  3. Merck Laboratories. Laktofenolblå mikroskopi i lösning. 2017. Finns på: Användare / Equipo / Nedladdningar
  4. Nödkort. Laktofenolblå lösning för svampfärgning. Universidad Pontificia Javeriana, Bogotá Colombia. 2014. Tillgänglig på: javeriana.edu.co
  5. González M, Diamont D, Gutiérrez B. Teknik för färgning av svampstrukturer med vegetabiliska färgämnen som ett icke-förorenande alternativ. Bioagro, 2011; 23 (1): 65-68. Finns i: Redalyc.
  6. Laboratorium Himedia. Laktofenol bomullsblå. 2017. Tillgänglig från: himedialabs.com
  7. Wanger A, Chavez V, Huang R, Wahed A, Actor J, Dasgupta A. Biokemiska tester och färgningstekniker för mikrobiell identifiering. Science Direct, 2017; 61-73. Tillgänglig från: Elsevier

Ingen har kommenterat den här artikeln än.