De Benedikts reagens är en blåaktig lösning av koppar som används för att detektera närvaron av reducerande sockerarter: aldehyder, alfa-hydroxiketoner och hemicetaler. Den utvecklades av Stanley R. Benedict (1884-1936).
Alfa-hydroxi-ketonsocker kännetecknas av att de har en hydroxylgrupp i närheten av ketonen. Under tiden är en hemiketal en förening som härrör från tillsatsen av en alkohol till en aldehyd eller keton. Benedikts reagens reagerar urskillningslöst med alla dessa reducerande sockerarter.
Benedikts metod är baserad på den reducerande effekten av socker på Cutvå+, av blå färg, som förvandlar den till Cu+. CU+ bildar en tegelröd fällning av kopparoxid. Beroende på koncentrationen av sockerarter visas dock ett spektrum av färger (övre bild).
Observera att om Benedictus reagens läggs till ett provrör utan att socker minskar (0%), genomgår det ingen förändring i dess blåaktiga färg. När således koncentrationen är högre än 4% färgas provröret brunt..
Artikelindex
Reagenset skapades av den amerikanska kemisten Stanley Rossiter Benedict 1909, som publicerade sin vetenskapliga artikel Ett reagens för detektion av reducerande sockerarter, i tidskriften J. Biol. Chem.
Vidare publicerade Lewis och Benedict (1915) en metod för bestämning av att reducera sockerarter i blod med användning av pikrat som en indikator; men slutade användas på grund av brist på specificitet.
Benedikts reagens liknar mycket på Fehlings. De skiljer sig åt genom att Benedict använder citratjonen och natriumkarbonatsaltet; medan Fehling använder tartratjonen och natriumhydroxiden.
Benedict-testet är kvalitativt, det vill säga det upptäcker bara förekomsten av reducerande sockerarter. Benedikts reagens kan dock vara kvantitativt om det har kaliumtiocyanat i lösning, vilket bildar en vit fällning av koppartiocyanat som kan titreras med användning av glukostandarder..
Benedict-reagenset används fortfarande för att detektera närvaron av glukos i urinen och är en indikation på diabetes sjukdom hos patienten, vars urin utsätts för Benedict test eller test. Även om det inte kan uteslutas att glukosuri har ett annat ursprung.
Exempelvis finns ökad glykosuri vid tillstånd som: graviditet, primär njurglykosuri, renal tubulär acidos, primär eller sekundär Fanconis syndrom, hyperaldosteronism och akut pankreatit eller bukspottskörtelcancer..
Benedikts reagens är blått på grund av närvaron av Cutvå+, som reduceras till Cu+ genom att minska sockerarter; i detta fall glukos, som bildar en tegelröd koppar (I) oxidfällning.
Färgen och bildningen av fällningen i Benedict-testet på urin varierar beroende på koncentrationen av det reducerande sockret. Om glukoskoncentrationen i urinen är mindre än 500 mg / dL blir lösningen grön och det bildas ingen fällning.
En glukoskoncentration i urinen på 500 - 1000 mg / dL orsakar en grön fällning i Benedict-testet. Vid en koncentration större än 1 000 till 1 500 mg / dL orsakar det bildandet av en gul fällning.
Om glukoskoncentrationen är 1 500 - 2 000 mg / dL, kommer en orange fällning att ses. Slutligen är en koncentration av glukos i urinen större än 2000 mg / dL, det kommer att orsaka bildandet av en tegelröd fällning..
Detta indikerar att Benedict-testet har en halvkvantitativ karaktär och resultatet rapporteras med kors. Således motsvarar exempelvis bildandet av en grön fällning ett kors (+); och bildandet av en tegelröd fällning motsvarar fyra korsningar (++++).
Benedikts reagens detekterar närvaron av reducerande sockerarter som har en fri funktionell grupp eller en fri ketonfunktionell grupp, som en del av deras molekylära struktur. Detta är fallet med glukos, galaktos, mannos och fruktos (monosackarider), liksom laktos och maltos (disackarider).
Sackaros och stärkelse reagerar inte med Benedikts reagens eftersom de har fria reducerande grupper. Dessutom finns det föreningar som stör Benedict-testet i urinen, vilket ger falsk positivitet; så är fallet med salicylat, penicillin, streptomycin, levodopa, nalidixinsyra och isoniazid.
Det finns kemikalier i urinen som kan minska Benedict-reaktionen. till exempel: kreatinin, urat och askorbinsyra.
Komponenterna i Benedikts reagens är följande: kopparsulfatpentahydrat, natriumkarbonat, trinatriumcitrat och destillerat vatten..
Kopparsulfatpentahydrat, CuSO45HtvåO, innehåller Cutvå+: är den förening som ger Benedikts reagens sin blå färg. Minskande socker påverkar Cutvå+, producerar sin minskning till Cu+ och bildandet av en fällning av kopparoxid (CutvåO) tegelrött.
Natriumkarbonat genererar ett alkaliskt medium som är nödvändigt för att reduktionen av koppar ska ske. Natriumkarbonat reagerar med vatten, genererar natriumbikarbonat och hydroxyljonen, OH-, ansvarig för alkaliniteten i mediet som är nödvändigt för att den reduktiva processen ska inträffa.
Natriumcitrat bildar ett komplex med koppar (II) som förhindrar att det genomgår en reduktion till Cu (I) under lagring.
5 ml av Benedikts reagens placeras i ett 20 x 160 mm provrör och 8 droppar urin tillsätts till det. Provröret skakas försiktigt och placeras i en behållare med kokande vatten i 5-10 minuter..
Efter denna tid avlägsnas röret från varmvattenbadet och dess yta kyls med rinnande vatten för att äntligen få en avläsning av resultatet som uppnås när man utför Benedict-testet (färgerna).
Minskningen av Cu (II) under Benedict-testet kan beskrivas enligt följande:
RCHO + 2 Cutvå+ (i komplex) + 5 OH- => RCOO- + CutvåO + 3 HtvåELLER
RCHO = aldehyd; RCOO- = (karboxylatjon); CutvåO = kopparoxid, en tegelröd fällning.
173 gram natriumcitrat och 100 gram natriumkarbonat vägs upp och löses tillsammans i 800 ml varmt destillerat vatten. Om spår av olösta ämnen observeras måste lösningen filtreras.
Å andra sidan löses 17,3 gram kopparsulfatpentahydrat i 100 ml destillerat vatten..
Därefter blandas de två vattenlösningarna försiktigt och fortsätter under permanent omrörning, vilket ger upp till 1000 ml med destillerat vatten..
Ingen har kommenterat den här artikeln än.