De STORA agar Det är ett fast, selektivt och differentierat odlingsmedium. Den var utformad för att isolera och hjälpa till att identifiera de viktigaste Candida-arterna. Dess namn BIGGY kommer från förkortningen på engelska Bismuth Glucose Glycine Yeast.
Den ursprungliga formeln skapades av Nickerson, varför detta medium också är känt som Nickerson agar. För närvarande består den av jästextrakt, glycin, dextros, ammoniumcitrat, vismutcitrat, natriumsulfit och agar..
BIGGY-agar är formulerad för differentiering av artkomplex C. albicans, C. tropicalis, C. krusei och C. kefyr, men andra arter växer också som Candida glabrata, C. parapsilosis, C. guilliermondii, Trichosporun sp, Geotrichum candidum och Saccharomyces cerevisiae.
Den har god känslighet och specificitet, men jämfört med andra medier med liknande funktion ligger den på andra plats, överträffad av CHROMagar. Av denna anledning föredrar många laboratorier det senare, även om det är mycket dyrare..
Det bör vara tydligt att användningen av BIGGY Agar, liksom andra liknande medel, hjälper till en snabb presumtiv identifiering, men aldrig bekräftande. Därför måste ytterligare identifieringsmetoder finnas tillgängliga. t.ex. Vitek 32 och API 20 identifieringssystem.
Artikelindex
BiGGY-agar anses vara ett delvis selektivt medium för isolering av jäst, särskilt av släktet Candida, även om andra släktingar kan växa.
Det är också ett differentierat medium eftersom olika egenskaper kommer att observeras i termer av utseende, färg, form och storlek beroende på vilken art som är inblandad. Det anses vara ett kromogent medium på grund av utvecklingen av olika färger i kolonierna.
Färgen på jästkolonierna beror på närvaron av vismutsulfit i agaren. Nickerson insåg att jäster av släktet Candida utför en extracellulär reduktion av vismutsulfit och förvandlar den till vismutsulfid (en olöslig svart substans). Detta resulterar i ljusbruna till svarta kolonier..
Denna agar innehåller jästextrakt och dextros, som ger källan till grundläggande näringsämnen och energi för jästutveckling. Glycin är ett jästtillväxtstimulerande medel, medan det hämmar tillväxten av vissa bakterier.
I samma mening fungerar ammonium och vismutcitrat, liksom natriumsulfit, som hämmare av bakterietillväxt. Agar är det medel som ger mediet en solid konsistens.
Väg 45 g av det uttorkade odlingsmediet och lös det i en liter destillerat vatten. Skaka och värm blandningen, koka i 1 minut tills den är helt upplöst. Detta odlingsmedium är inte autoklaverbart.
Häll 20 ml på sterila petriskålar vid kylning till cirka 45 ° C i ett vattenbad..
Färgen på det uttorkade mediet är gulgrått och berett är en gulvit gel, i vilken en lätt flockande fällning kan observeras.
PH bör vara 6,8 ± 0,2.
Det beredda mediet ska förvaras i kylskåp (4 ° C) och skyddas mot ljus. Eftersom det är ett medium som inte kan autoklaveras, bör det användas så snart som möjligt. Användningen rekommenderas inom tre dagar efter beredningen.
Plattorna inkuberas vid rumstemperatur (25 ° C) under 24, 48 och 72 timmar, och inkubationstiden kan förlängas upp till 5 dagar..
Varje Candida-art utvecklar vissa egenskaper som skiljer varandra från varandra. Tillverkarna av mediet beskriver följande egenskaper för varje art:
-Candida albicans-komplex: utvecklas på denna agar som släta, runda, bruna eller svarta kolonier, med en lätt mycelgräns. Med undantag för att den mörka färgen inte sprids till mediet.
-Candida tropicalis: kolonierna är ljusa, små, mörkbruna, med ett svart centrum och en liten mycelgräns. Den mörka färgen diffunderar mot mitten, en egenskap som är typisk för denna art, efter att ha inkuberats i 72 timmar..
-Candida krusei utvecklar stora, platta, grovt utseende kolonier med en brun till svartaktig kant.
-Candida parakrusei: medelstora kolonier, oftast grova, platta. Färgen kan variera från ljus mörk rödbrun till ljus rödbrun. Gränserna mellan kolonierna har omfattande, gulaktigt mycel.
-Candida stellatoidea: Utvecklar medelstora, platta, mörkbruna, nästan svarta kolonier. Mycelial utveckling är mycket knapp.
En studie utförd av Yücesoy och Marol 2003 visade att CHROMagar-medium har bättre känslighet och specificitet för differentiering och identifiering av olika Candida-arter än BIGGY-agar..
För sterilitetskontrollen inkuberas oinokulerade plattor vid 25 ° C, i mörker under 24 till 48 timmar, det förväntas att det inte finns någon tillväxt av något slag eller färgförändring..
De ATCC-stammar som rekommenderas för kvalitetskontroll av mediet är:
Candida albicans-komplex ATCC 60193, Candida glabrata ATCC 2001, Candida krusei ATCC 34135. I alla dem förväntas tillväxt enligt beskrivningen ovan..
Följande stammar kan också användas:
Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 och Staphylococcus epidermidis ATCC 12228. Under de första två förväntas total hämning, men i fall av delvis växande kolonier blir krämfärgade.
I fallet med S. aureus det förväntas vara helt inhiberat, men om de delvis växer är deras kolonier vita.
Vissa bakterier kan utvecklas i detta medium och kan till och med bli mörka i färgen och simulera en Candida-koloni, men när man gör en smet på kolonin och observerar den under ett mikroskop, kastas den lätt.
Tabell: Egenskaper för kolonierna av vissa jästar på BIGGY agar enligt arbetet med Yücesoy M och Marol S.
Ingen har kommenterat den här artikeln än.