De chokladagar Det är ett fast, anrikat, icke-selektivt och icke-differentiellt odlingsmedium. Det används främst för isolering av krävande mikroorganismer ur näringssynpunkt, även om vilken typ av bakterier som helst kan växa i den..
Det är därför dess användbarhet ökar särskilt vid sådd av prover som normalt är sterila, såsom CSF och ledvätska. Även om det också ingår i det valda sättet för sådd av polymikrobiella prover, men i dessa fall är det nödvändigt att tillsätta antibiotika som hämmar samtidig flora..
Detta medium har en karakteristisk brun färg som mycket liknar choklad, därav namnet. Beredningen liknar mycket blodagars, bara i detta fall måste blodet värmas upp för att de röda blodkropparna ska bryta ner..
Dess beredning, som blodagar, är mycket ömtålig, eftersom den lätt förorenas. Av denna anledning föredrar många laboratorier att förvärva detta medium som redan är utarbetat av kommersiella företag som garanterar dess kvalitet..
Artikelindex
Detta medium består av en näringsrik agarbas och uppvärmt blod. Hemolysen av röda blodkroppar ger faktor X (hemin) och faktor V (NAD), nödvändig för tillväxt av vissa mikroorganismer, såsom släktet Haemophilus. Det är också mycket användbart för isolering Neisserias sp.
Precis som blodagar kan olika medier användas som basagar beroende på behovet. Bland de media som används är hjärthjärtinfusion och tryptikassoja, även om de mest rekommenderade är Columbia-agar, Müeller Hinton, GC-agar och Thayer Martin-agar..
Vissa varianter av chokladagar inkluderar ett kommersiellt tillgängligt berikat tillskott som heter Isovitalex eller Polivitex..
Dessa tillskott innehåller vitamin B12, L-glutamin, adenin, guaninhydroklorid, p-aminobensoesyra, nikotinamidadenindinukleotid (NAD), tiaminpyrofosfat, järnnitrat, tiaminhydroklorid, cysteinhydroklorid, L-cystin och glukos.
Det är viktigt att notera att chokladagar är mer anrikat än blodagar, men det tillåter inte observation av hemolysmönster..
Detta medium innehåller bukspottskörtelns smältning av kasein och hjärta, peptisk smältning av kött, natriumklorid, agar, jästextrakt och majsstärkelse. Det är också rikt på vitaminer, mineraler och essentiella aminosyror.
Denna uppvärmda blodbas är idealisk för isolering av bakterier av släktet Neisseria. Å andra sidan, om ett tillskott för Brucella dessutom tillsätts till mediet, kan den ovannämnda mikroorganismen isoleras. Resultaten förbättras med hjälp av hästblod.
Detta medium innehåller peptoner, majsstärkelse, monobasiska och dibasiska buffertar, natriumklorid och agar..
De flesta kommersiellt beredda chokladagarpresentationerna kommer med denna bas och innehåller inte uppvärmt blod utan en syntetisk blandning av hemin och ett kemiskt tillskott av tillväxtfaktorer, vitaminer, mineraler, aminosyror, faktor V och glukos..
Det används för att utföra antimikrobiell känslighetstestning av snabba mikroorganismer, såsom Streptococcus pneumoniae med 5% upphettat ramblod.
Det används också för den primära isoleringen av Neisserias och Haemophilus, men i det särskilda fallet med isolering av Haemophilus Användning av hästblod är att föredra, eftersom det är en rik källa till faktor X och V.
Å andra sidan, om provet som ska sås kommer från ett icke-sterilt område rekommenderas tillsats av antibiotika för att hämma den normala floran i området..
Exempel på andningsprover där det finns misstänkt förekomst av bakterier i släktet Haemophilus Bacitracin används för att hämma tillväxten av Staphylococcus, Micrococcus, Streptococcus och saprofytiska Neisserias.
När det gäller könsprover, där det misstänks Haemophilus ducreyi, En chokladagar framställd enligt följande har framgångsrikt använts: Müeller-Hinton-agar med 5% chokladiserat hästblod, 1% Isovitalex-anrikning och 3 µg / ml vankomycin.
Detta medium är speciellt för isolering av Neisseria gonorrhoeae. Den måste innehålla antibiotika för att hämma medföljande flora. Lammets blod används.
Du bör se indikationerna för beredningen av basagaren som ska användas. De finns på baksidan av behållaren i det uttorkade mediet. De beskriver i allmänhet hur mycket du måste väga för att förbereda en liter odlingsmedium.
I laboratoriet kan den exakta mängden som behövs beredas, den kan vara mer eller mindre än en liter.
En regel om tre används för att beräkna hur mycket som ska vägas för att förbereda önskad volym. Exempel:
Om det är nödvändigt att väga 40 g för 1 liter och laboratoriet kräver 800 ml, sägs det:
1000 ml -40 gr
800 ml - X
Formeln kommer att vara som följer:
X = 32 gr (kvantitet som ska vägas i 800 ml).
Den nödvändiga mängden vägs och placeras i en kolv med vattnet.
Värm över måttlig värme och blanda försiktigt med roterande rörelser tills det uttorkade mediet helt löses upp, låt det koka i 1 minut..
Kolven placeras i autoklaven för att sterilisera mediet vid 121 ° C under 20 minuter..
När du lämnar autoklaven, låt den vila tills temperaturen på mediet är ungefär mellan 56 och 70 ° C för att placera blodet och blanda tills mediet blir brunt..
Om du lägger till kosttillskott är det dags att göra det. Blanda därefter och servera 20 ml till varje steril petriskål.
Hela proceduren ska göras i en laminär fläktkåpa eller runt Bunsen-brännaren..
Låt stå fast och förvara inverterat i kylen.
Basmediet framställs såsom beskrivits ovan, det kommersiellt erhållna dehydratiserade hemoglobinet löses och steriliseras i autoklaven..
Båda lösningarna får svalna till 50 ° C, förenas och tillsatsen tillsätts. Blanda under aseptiska förhållanden och servera sedan i sterila petriskålar..
Det är viktigt att blodet placeras vid den angivna temperaturen, eftersom det är det perfekta att lysera de röda blodkropparna och samtidigt upprätthålla faktor V, som är temperaturkänslig..
Inga bubblor ska finnas kvar på agarytan. Från varje sats med 100 plattor ska en eller två plattor inkuberas i ugnen vid 37 ° C i 24 timmar för att kontrollera deras sterilitet..
För bästa resultat bör chokladagar användas strax efter beredningen..
Kontrollbakteriestammar bör förvaras i laboratoriet för att utvärdera effekten av det färska mediet för tillväxt av de viktigaste snabba mikroorganismerna av klinisk betydelse..
Ingen har kommenterat den här artikeln än.