Salmonella-Shigella agar skäl, beredning och användning

2367
Simon Doyle

De Salmonella-Shigella agar även känd som SS-agar, är det ett måttligt selektivt och differentiellt medium, speciellt utformat för isolering av enteropatogena bakterier av Salmonella- och Shigella-släkten, både från miljö- och kliniska prover..

SS-agar har en komplex komposition; Den består av köttextrakt, pepton, laktos, gallsalter, natriumcitrat, natriumtiosulfat, järncitrat, agar, neutralt rött, ljusgrönt och destillerat vatten. Med tanke på dess stora selektivitet kan prover med riklig blandad flora sås..

SS-agar med kolonier av Salmonella sp. Källa: Manurx27 [CC BY-SA 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0)], från Wikimedia Commons

I mikrobiologilaboratorier används Salmonella-Shigella-mediet i stor utsträckning för att undersöka närvaron av Salmonella och Shigella i diarréprov, avloppsvatten, dricksvatten och mat..

Ibland är det nödvändigt att använda förberikningsbuljong (laktosbuljong) och anrikningsbuljong (selenit cystinbuljong) för att återvinna stammar av Salmonella.

Dessa steg krävs när man misstänker förekomsten av Salmonella i en mycket låg kvantitet, eller om stammen kan missbrukas av processer av industriell produktion, främst bearbetade livsmedel. Det rekommenderas också att berika avföringsprover från patienter som har behandlats med antibiotika..

Därefter kan den anrikade buljongen sås på Salmonella-Shigella-agar och andra liknande medier, såsom xylosagar, lysindoxikolat (XLD) och enterisk Hektoen-agar (HE)..

Artikelindex

  • 1 Motivering
    • 1.1 Näringskraft
    • 1.2 Konsistens
    • 1.3 Selektiv
    • 1.4 Differential
  • 2 Förberedelse
  • 3 Använd
  • 4 Begränsningar
  • 5 Kvalitetskontroll
  • 6 Referenser

Grund

Varje komponent i Salmonella-Shigella-odlingsmediet har en specifik funktion och blandningen som helhet ger den de egenskaper som kännetecknar den..

Närande kraft

Köttextraktet och peptonen (smält med kasein och djurvävnad) ger de nödvändiga näringsämnena (kväve, kol och vitaminer) för utveckling av mikroorganismer som kan tolerera resten av komponenterna..

Konsistens

Agar-agaren är ansvarig för att ge mediet fast konsistens.

Selektiv

Detta medium är mycket selektivt eftersom det innehåller gallsalter, natriumcitrat och ljusgrönt. Därför hämmar den tillväxten av alla Gram-positiva bakterier och de flesta Gram-negativa basillerna, inklusive vissa koliforma ämnen..

Medan bakterier av släktet Salmonella och vissa stammar av Shigella stöder dessa föreningar.

Huvudsakligen är Salmonella-släktet mycket motståndskraftigt mot gallsalt, så mycket att de kan leva i gallblåsan hos vissa bärarpatienter som ständigt tappar bakterierna i avföringen..

Differentiell

Laktos är det fermenterbara kolhydraten som hjälper till att skilja laktosjäsande stammar från icke-jäsande. Denna egenskap framgår av närvaron av pH-indikatorn, som i detta medium är fenolröd.

Laktosjäsande stammar ger röda kolonier, medan icke-jäsande stammar är färglösa. Denna egenskap är viktig eftersom Salmonella och Shigella inte jäser laktos..

Å andra sidan innehåller detta medium natriumtiosulfat som sulfidkälla och järncitrat som järnkälla. Båda föreningarna kan skilja bakterier som kan producera vätesulfid. Dessa reagerar för att bilda en synlig, olöslig svart järnsulfidutfällning..

Denna egenskap finns i vissa stammar av släktet Salmonella. Normalt är deras kolonier platta färglösa med en svart prick i mitten av den. Resten av Salmonellas producerar inte HtvåS och utvecklas som färglösa kolonier.

Å andra sidan är kolonier av släktet Shigella platta färglösa utan att svarta..

Förberedelse

Detta medium är väldigt enkelt att förbereda.

Väg 63 g av det uttorkade kommersiella mediet och lös upp det i en liter destillerat vatten. Värm lösningen och rör om. Blandningen kan koka i upp till minuter.

Detta medium får inte autoklaveras. Efter upplösning serveras den direkt på enkla eller dubbla sterila plattor..

När de stelnar ordnas de inverterat i plack och förvaras i kylskåp (2-8 ° C) tills de används..

Mediet efter beredning bör ha pH 7,2 ± 0,2 och med en orange-röd färg..

Det är viktigt att låta plattorna värmas upp innan proverna sås ut. Det ursprungliga provet kan sås direkt, släppa ut material på en del av agaren och sedan sträcka ut genom utmattning därifrån.

Om du använder anrikad buljong, passera en del av selenitbuljongen och så med en drigalski-spatel.

Inkubera vid 37 ° C i 24 timmar i aerobios.

Det måste beaktas att antalet gram som ska vägas och det slutliga pH-värdet för mediet kan variera från ett kommersiellt hus till ett annat. Den mellersta basen ger alltid indikationerna för dess förberedelse.

Använda sig av

Det används ofta i avföringskulturanalys och i den mikrobiologiska studien av avloppsvatten, dricksvatten och matprover..

Ofta bereds dubbla plattor, på ena sidan placeras Salmonella-Shigella-agar och på den andra XLD-agaren.

Begränsningar

-Vissa Shigella-stammar växer inte på detta medium. Därför rekommenderas det inte för primär isolering av detta släkt..

-Inte varje transparent koloni med ett svart centrum är ett tecken på Salmonella; Biokemiska tester måste utföras för att göra en korrekt identifiering, eftersom kolonierna av vissa Proteus-stammar inte kan särskiljas från Salmonella.

-Det uttorkade mediet måste tas om hand från exponering för miljön, eftersom det är mycket hygroskopiskt. Därför måste den förvaras i en torr och väl stängd miljö. Öppet under mycket korta perioder.

-Med tiden kan gallsalterna i mediet fällas ut och bilda en mattliknande bild i agaren, men detta påverkar inte resultaten..

-Vissa Shigella-stammar kan långsamt jäsa laktos.

QA

För att bevisa att mediet fungerar korrekt är det lämpligt att plantera kända eller certifierade kontrollstammar och observera om tillväxten uppfyller de förväntade egenskaperna..

För detta kan du använda stammar av E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium eller Enterococcus faecalis.

De förväntade resultaten är:

Escherichia coli --rosa konvexa kolonier.

Enterobacter och Klebsiella- stora kolonier och röda eller rosa slemhinnor.

Shigella flexneri --klara eller färglösa platta kolonier.

Salmonella typhimurium - färglösa kolonier med svart centrum.

Enterococcus faecalis-- total hämning.

Referenser

  1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories. Salmonella-Shigella agar. 2009. Tillgänglig på: f-soria.es
  2. BD-laboratoriet. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013. Tillgänglig på: bd.com
  3. Britannia Laboratories. Salmonella-Shigella Agar. 2015.Tillgängligt på: britanialab.com
  4. Valtek diagnostik. Salmonella-Shigella Agar (SS Agar). Finns på: andinamedica.com
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnos. 12 utgåva Redaktionellt Panamericana S.A. Argentina.
  6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnos. 5: e upplagan Redaktionellt Panamericana S.A. Argentina.

Ingen har kommenterat den här artikeln än.