Lysande grön agarfundament, beredning och användningsområden

5024
Egbert Haynes

De ljusgrön agar Det är ett fast odlingsmedium med hög grad av selektivitet. Den används uteslutande för isolering av stammar av släktet Salmonella, men det finns några undantag, såsom tyfi- och paratyphi-arter som inte växer i detta medium..

Sökandet efter släktet Salmonella är frekvent i avföring, vatten eller matprover. I denna mening kan detta medium vara mycket användbart. Denna agar skapades 1925 av Kristensen, Lester och Jurgens, senare modifierades den av Kauffmann.

Ljusgrön agar. Jäsning respektive jäsning av kolonier. Källa: M J Richardson / Invisible Worlds utställning - 2012geograph.org.uk/photo/2815842 Creative Commons License.

Den består av pluripeptoner från peptisk smältning av djurvävnad och bukspottkörtelsmältning av kasein, den innehåller också jästextrakt, natriumklorid, laktos, sackaros, fenolröd, ljusgrön och agar-agar..

Det kännetecknas av att det är en ganska ogästvänlig miljö för de flesta bakterier, vilket gynnar tillväxten av Salmonella, men vissa koliformer kan leva i den och utvecklas svagt.

Det är viktigt att notera att släktet Shigella inte växer i denna miljö och inte heller Salmonella typhimurium, varken Salmonella paratyphi. Därför, om du vill isolera dessa mikroorganismer, bör du använda andra media, till exempel XLD-agar..

Artikelindex

  • 1 Motivering
    • 1.1 Ljusgrön agar
    • 1.2 Varianter av ljusgrön agar (BGA)
  • 2 Förberedelse
  • 3 Användningar / applikationer
  • 4 Kvalitetskontroll
  • 5 Referenser

Grund

Ljusgrön agar

Var och en av komponenterna som utgör mediet uppfyller en specifik funktion som bestämmer agarens egenskaper och egenskaper..

Pluripeptoner och jästextrakt är källan till näringsämnen från vilka mikroorganismer tar kvävet och mineralerna som är nödvändiga för deras utveckling. Laktos och sackaros är energikällor för mikroorganismer som kan jäsa dem..

Ljusgrön är det hämmande ämnet som förhindrar tillväxten av Gram-positiva bakterier och ett stort antal gramnegativa mikroorganismer..

Natriumklorid ger mediet osmotisk stabilitet. Medan fenolrött är pH-indikatorn ändrar det färg när man upptäcker produktionen av syror från jäsning av kolhydrater..

De icke-jäsande kolonierna av laktos och sackaros växer på detta medium i en rosa eller transparent vit färg, på en röd bakgrund. Till exempel bakterier av släktet Salmonella.

Medan laktos- eller sackarosjäsande bakterier som kan växa på detta medium utvecklas gröngula eller gulgröna kolonier på en gröngul bakgrund. Till exempel, Escherichia coli och Klebsiella pneumoniae.

Ljusa gröna agarvarianter (BGA)

Det finns andra varianter av ljusgrön agar; Novobiocin Brilliant Green Glucose (NBG) Agar och Novobiocin Brilliant Green Glycerol Lactose (NBGL) Agar.

Novobiocin ljusgrön glukosagar (NBG)

Innehåller tryptikassoyagar, järnammoniumcitrat, natriumtiosulfatpentahydrat, fenolrött, glukos, ljusgrönt, novobiocin och destillerat vatten.

Det används för isolering av Salmonellakolonier från avföringsprover.

I det här fallet är ljusgrönt och novobiocin de hämmande substanserna som förhindrar tillväxten av grampositiva bakterier och vissa gramnegativa mikroorganismer..

Natriumtiosulfat är källan till sulfid och järncitrat är källan till järn, båda nödvändiga för att avslöja vätesulfidproduktion genom bildandet av en svart järnsulfidfällning..

Glukos är det jäsbara kolhydraten och fenolrött är pH-indikatorn..

I detta medium utvecklas Salmonellakolonier stora med ett svart centrum omgiven av en rödaktig gloria och följt av ett tydligt synligt område. Några stammar av Citrobacter freundii producera kolonier identiska med Salmonella.

Novobiocin Brilliant Green Glycerol Lactose Agar (NBGL)

Detta medium innehåller tryptikassoya, järnammoniumcitrat, natriumtiosulfat, laktos, glycerol, ljusgrön, novobiocin och destillerat vatten..

Skillnaden mellan detta medium och det tidigare är att glukos ersätts med laktos och glycerol och fenolrött inte används..

Mediet används också för att isolera Salmonella-arter, kolonierna utvecklas svarta på grund av produktionen av vätesulfid.

Endast kolonier som inte producerar syra från glycerol eller laktos uppnår H-produktiontvåDet är tillräckligt, eftersom det låga pH-värdet stör bildandet av HtvåS. Detta resulterar i färglösa kolonier för de flesta Proteus- och Citrobacter-arter..

Förberedelse

-Väg 58 gram av det kommersiellt erhållna dehydratiserade mediet. Tillsätt den till en liter omdestillerat vatten. Blanda, låt stå några minuter och placera beredningen under en värmekälla tills den löser sig helt..

-Autoklav vid 121 ° C i 15 minuter, överskrid inte steriliseringstiden.

-Låt stå och servera medan det är varmt i sterila petriskålar. Det slutliga pH-värdet bör vara 6,9 ± 0,2.

-Låt stelna och förvara i kylskåp tills det används. Innan sådd ska plattorna ta rumstemperatur.

-Det pulverformiga mediet är grönt och berett tar en orange-brun eller rödgrön färg, beroende på pH och det kommersiella företaget. En mycket brun färg indikerar att agaren var överhettad..

-När agaren har stelnat rekommenderas den inte att omarbetas eftersom mediet försämras..

Användningar / applikationer

Detta medium används för att söka efter stammar av släktet Salmonella från avföringsprover och bland annat mejeriprodukter..

Eftersom det är en ganska ogästvänlig miljö, är det lämpligt att så en riklig ympning om det direkta provet används. Annars bör en föranrikning och anrikning av proverna göras innan sådd i detta medium..

Eftersom vissa Salmonella-stammar hämmas eller växer med svårighet, rekommenderas det att följa detta medium med annan selektiv agar för Salmonella.

Varje koloni med en typisk Salmonella-egenskap måste underkastas biokemiska tester för definitiv identifiering..

QA

För att testa bra prestanda hos det ljusgröna agarmediet kan ATCC-stammar användas för att observera deras utveckling på det..

De vanligaste stammarna som används för kvalitetskontroll är: Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Escherichia coli ATCC 25922,  Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538.

De första 3 ska ge rosa eller genomskinliga vita kolonier på röd bakgrund. Salmonella med god utveckling och Proteus med dålig eller regelbunden tillväxt.

För Klebsiella och Escherichia förväntas gröngula kolonier med gul bakgrund och i fallet med Shigella och Staphylococcus bör de hämmas.

Det uttorkade mediet måste förvaras vid rumstemperatur, på en torr plats, eftersom mediet är mycket hygroskopiskt.

Referenser

  1. Laboratorio Difco Francisco Soria Melguizo S.A. Lysande grön agar. 2009
  2. Britannia-laboratoriet. Ljusgrön Agar. 2015..
  3. BD-laboratoriet. BD Brilliant Green Agar. 2013.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnos. (5: e upplagan). Argentina, Ledare Panamericana S.A.
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. 2009. Bailey & Scott mikrobiologisk diagnos. 12 utgåva Argentina. Redaktionellt Panamericana S.A

Ingen har kommenterat den här artikeln än.