De kromatogram är ett tvådimensionellt grafiskt register som erhållits på ett absorberande medium som visar separationen av ämnen genom kromatografi. Ett synligt mönster, toppar eller fläckar bildas på kromatogrammet, vilket återspeglar den fysiska separationen av komponenterna i en blandning.
Den nedre figuren är ett kromatogram med tre toppar, A, B och C, av tre komponenter i provet åtskilda genom kromatografi. Det observeras att var och en av de tre topparna har olika höjd och placering på kromatogrammets tidsaxel..
Ordinaten eller Y-axeln registrerar information om signalens intensitet (i millivolt mV i detta fall). Representerar registreringen, beroende på detektorn, av någon fysisk egenskap hos ämnet eller separat komponent i blandningen.
Toppens höjd är proportionell mot koncentrationen av komponenten separerad från provet i ett optimalt system. Således är det till exempel lätt att visualisera att komponent B finns i en högre andel än A och C.
På abscissa- eller X-axeln representeras retentionstiden för komponenterna i provet eller blandningen. Det är tiden som går från injektionen av provet tills det slutar, vilket är olika för varje ren substans.
Artikelindex
Det är den slutliga registreringen av hela kromatografiprocessen. Parametrar som är av analytiskt intresse erhålls från den. Detta kan erhållas som en elektronisk fil, ett tryckt histogram eller på processmediet; på papper, till exempel.
Y-axeln genereras av signal- eller intensitetsresponsdetektorer, såsom spektrofotometrar. En optimal analys av tiden, av egenskaperna hos de erhållna topparna eller fläckarna är väsentlig; storlek, plats, färg, bland andra aspekter.
Kromatogramanalyser kräver vanligtvis användning av kontroller eller standarder, ämnen med känd identitet och koncentration. Analysen av dessa kontroller gör det möjligt att fastställa jämförelse med de karakteristiska proverna för komponenterna i det undersökta provet.
I kromatogrammet kan observationen och analysen av hur separationen av komponenterna i en blandning utfördes utföras. Dess optimala studie gör det möjligt att identifiera ett ämne, visa dess renhet, kvantifiera mängden ämnen som finns i en blandning, bland andra aspekter.
Den extraherade informationen kan vara kvalitativ; till exempel när ämnen identifieras och deras renhet bestäms. Kvantitativ information avser bestämningen av antalet komponenter i blandningen och koncentrationen av den separerade analyten..
Genom att analysera resultaten av kromatogrammet kan olika ämnen identifieras genom att jämföra retentionstiderna med kända ämnen. Det kan observeras om ämnena som studeras går samma avstånd om de har samma tid som de kända ämnena.
Till exempel kan kromatogrammet detektera och identifiera metaboliter av läkemedel som stimulanser och steroider i idrottarens urin. Det är ett viktigt stöd i studien och forskningen av vissa metaboliter som produceras av genetiska störningar hos det nyfödda.
Kromatogrammet underlättar detekteringen av bland annat halogenerade kolväten i dricksvatten. Det är viktigt i laboratoriekvalitetsanalyser, eftersom det gör det möjligt att upptäcka och identifiera de föroreningar som finns i de olika produkterna.
I ett kromatogram kan du skilja mellan rena och orena ämnen. En ren substans skulle ge en enda topp på kromatogrammet; medan en oren substans skulle producera två eller flera toppar.
Genom att korrekt justera förhållandena under vilka kromatografi utförs kan två ämnen förhindras från att bilda en enda topp..
Genom att analysera kromatogrammets topparea kan koncentrationen av provkomponenterna beräknas.
Därför är topparean proportionell mot mängden ämne som finns i provet. Dessa kvantitativa data erhålls i mycket känsliga system, till exempel sådana som genereras genom gas eller vätskekromatografi.
En av klassificeringarna av kromatogram är nära besläktad med de olika typerna av kromatografi, som genererar motsvarande kromatogram..
Beroende på driftsförhållandena varierar detektorerna, bland annat, kromatogrammet i dess innehåll och kvalitet..
Kromatogrammet kan genereras direkt på papper eller tunt lager, vilket direkt visar fördelningen eller fördelningen av komponenterna i provet.
Det är mycket användbart för separation och studier av färgade ämnen som har naturliga pigment, såsom klorofyll. Det kan utsättas för utvecklingsprocesser om ämnena inte har naturlig färg, och det är användbart för kvalitativa studier.
Kromatogrammet kan också erhållas med hjälp av en detektor som registrerar svaret, utsignalen eller slutsignalen för kromatografin. Som nämnts tidigare är denna detektor vanligtvis en spektrofotometer, en masspektrometer, automatiska sekvenserare, elektrokemikalier, bland andra..
Kromatogram som genereras i kolumner, oavsett om det är gaser eller vätskor, liksom de med hög upplösning i tunna lager, använder detektorer.
Beroende på typen av detektor kan kromatogrammet klassificeras i differentiell eller integrerad, beroende på detektorns svarsform..
En differentialdetektor mäter kontinuerligt svarsignalen från kromatogrammet, medan integrerade detektorer kumulativt mäter motsvarande signal.
Ett differentiellt kromatogram är ett kromatogram som erhålls av en differentiell detektor. Dessa detektorer inkluderar till exempel spektrofotometrar och detektorer för förändringar i elektrisk ledningsförmåga..
Denna typ av kromatogram har visat resultatet av separationen av anjoner från ett prov, detekterat genom indirekt fotometri. Samma resultat har också erhållits för studier av joner, till exempel med slutlig detektion genom konduktimetri..
Den övre grafen visar exemplet på ett differentiellt kromatogram, erhållet med automatiska DNA-sekvenser (deoxiribonukleinsyra). Grafen visar tydligt toppar i fyra färger, en färg för varje kvävebas i DNA..
Genom stöd av ett datoriserat program underlättas tolkningen av sekvensen av baserna i det analyserade DNA, liksom för mer komplexa analyser..
Det integrerade kromatogrammet motsvarar det som erhålls av en integrerad detektor. Detta kromatogram visar produktionen av en enda komponent som studeras. Flera toppar erhålls inte som i differentialen.
I det integrerade kromatogrammet erhålls en post med en form som beskrivs som ett steg. Denna form är den del av kromatogrammet som motsvarar mängden av en enda substans som lämnar kolonnen..
Ingen har kommenterat den här artikeln än.