Näringsagargrund, beredning och användningar

3047
Charles McCarthy

De näringsagar Det är ett fast icke-selektivt och icke-differentiellt odlingsmedium. I detta medium växer alla typer av bakterier som inte är krävande ur näringssynpunkt..

Det är ett enkelt medium och trots sitt namn innehåller det ett lägre näringsvärde jämfört med andra liknande medier, som hjärthjärtinfusionsagar eller tryptikassoyagar..

Koloni räknar med näringsagar

Dess användbarhet i laboratoriet är mycket varierande. Används främst för artsubkultur, stamunderhåll, koloniräkning, som grund för bland annat beredning av blodagar..

På grund av dess ljusbeige färg produceras också pigmentproduktion av vissa bakteriestammar, såsom det gröna pigmentet av Pseudomonas aeruginosa, det tegelröda pigmentet som produceras av Serratia marcescens vid rumstemperatur, det guldgula pigmentet av Staphylococcus aureus, bland andra.

Dessutom är det ett av de billigaste växande medier som finns på marknaden..

Artikelindex

  • 1 Motivering
  • 2 Sammansättning
  • 3 Förberedelse
  • 4 användningsområden
    • 4.1 Som grund för beredning av blodagar
    • 4.2 Stimulera sporulering av sporbildande bakterier
    • 4.3 Stamunderhåll
    • 4.4 Kolonitalet
    • 4.5 Köra diagnostiska tester
    • 4.6 Återhämtning av mesofila aerober från saltvatten (stränder)
  • 5 Referenser

Grund

Som redan nämnts ovan är det ett mycket enkelt medium som är baserat på att ge näringsämnen för bakterietillväxt utan begränsning och utan komplexa reaktioner att tolka..

Eftersom mediet är genomskinligt är det perfekt för att räkna kolonier med djupsåddmetoden..

Sammansättning

Den består huvudsakligen av köttextrakt eller jästextrakt, peptoner eller gelatin-bukspottkörteln, agar-agar, natriumklorid och destillerat vatten..

Kött- eller jästextraktet och peptonerna representerar de väsentliga källorna till kol och mineraler (kväve, fosfor och svavel), som kommer att användas av bakterier som en källa till energi och tillväxtfaktorer..

På samma sätt är agar-agar basen för alla fasta odlingsmedier och kommer att ersätta gelatin, som var den första basföreningen som användes av Robert Koch för att ge solid konsistens till sina medier..

Agar är en polysackarid som består av galaktos, galaktomannan, agaros och agaropektin. Ställer in vid 40 ° C och smälter nära 100 ° C.

För sin del ger natriumklorid mediet den osmolaritet som är nödvändig för bakteriell utveckling.

Slutligen tjänar vattnet till att hydratisera och lösa de frystorkade föreningarna. Destillerat vatten justerat till neutralt pH bör användas. Kranvatten ska inte användas eftersom det innehåller kalcium och magnesium som kan reagera med fosfater i mediet och bilda olösliga salter..

Förberedelse

För en liter näringsagar måste 31 g av det uttorkade mediet vägas. Den placeras i en kolv och löses i en liter destillerat vatten. Värm över en värmekälla efter 5 minuter och blanda hela tiden tills den kokar i 1 eller 2 minuter..

Beredning av odlingsmedium.

Kolven placeras sedan i en autoklav och steriliseras vid 121 ° C under 20 minuter..

Sterilisering i autoklav

I slutet av tiden avlägsnas den från autoklaven och serveras i sterila petriskålar med en laminär fläktkåpa eller en bunsenbrännare..

Om petriskålarna är av engångstyp (plast) måste mediet distribueras när agaren har en temperatur på cirka 50 ° C för att förhindra att de deformeras av för hög värme.

Låt stelna och förvara på en inverterad tallrikshållare och kyl i 2-8 ° C tills den används.

Plattorna måste härdas innan de sås ut. Näringsagarplattor ska inte användas om de är förorenade eller uttorkade.

PH i det beredda mediet måste justeras till 7,3 ± 0,2.

Applikationer

Det är det enklaste odlingsmediet som används i mikrobiologilaboratoriet. Dess formulering är utmärkt för tillväxt av icke-krävande bakterier.

Dess huvudsakliga användningsområden förklaras nedan:

Som grund för beredning av blodagar

Detta medium används ibland som en bas för att bereda blodagar, men det är inte den vanligaste basen..

Stimulera sporuleringen av sporbildande bakterier

Detta odlingsmedium är särskilt användbart för att stimulera sporulering av sporbildande bakterier såsom Bacillus sp.

För att göra detta, en stam av släktet Bacill och inkuberades under 24 timmar vid 37 ° C i aerobios. När kolonierna har vuxit utsätts plattan för temperaturbelastning, det vill säga ugnens temperatur höjs till 44 ° C och lämnas i ytterligare 24 timmar eller placeras i kylskåp i 24 timmar.

I slutet av tiden görs utstryk av kulturen och färgas med Gram-fläck eller med Shaeffer-Fulton-sporfläck. I dem kommer bacillerna med endosporer (sporer inuti bacillus) och exosporer (sporer utanför bacillus) att observeras..

Stamunderhåll

Vissa forskningslaboratorier eller universitetsundervisningsstödlaboratorier kräver att livskraftiga bakterier av klinisk betydelse upprätthålls så länge som möjligt för att använda bakteriebanken (bacterioteca) för forskningsarbete eller för beredning av undervisningsmetoder, där studenterna kommer att lära sig att manipulera och identifiera dessa mikroorganismer.

Näringsagar, såväl som hjärninfusionsagar, kan användas för detta ändamål. Agaren bereds, hälls i rör med ett bakelitlock och lutas på en bas, på ett sådant sätt att agaren stelnar och bildar ett block i botten och en fas på ytan (flöjtnäbb).

Varje rör är märkt med namnet på de bakterier som ska sås och datumet. Var och en av bakterierna sås ut på ramen och inkuberas i 24 timmar, när kolonierna har vuxit lagras rören vid rumstemperatur.

Bakteriotekan måste förnyas från 1 till 3 månader för att undvika kontaminering och uttorkning av mediet och såväl som bakteriedöd..

Endast icke-kräsna bakterier kan bibehållas på detta sätt.

Kolonieräkning

Även om det finns specialiserade medel för att räkna kolonier, såsom standardräkningsagar, kan näringsagar användas för detta ändamål, antingen genom ytsådd med en drigalski-spatel eller genom djup. Av denna anledning är det mycket användbart vid mikrobiologisk analys av mat och vatten..

Kör diagnostiska tester

Eftersom det är ett medium som inte innehåller blod, eller något annat tillsatsmedel, är det perfekt för att ta kolonier som odlas på detta medium för att utföra katalastestet..

På grund av dess ljusa färg indikeras det också att utföra oxidastester direkt på ett område av den utsädda agaren utan störningar..

Återhämtning av mesofila aerober från saltvatten (stränder)

Näringsagaren beredd med 10% havsvatten är användbar för utvärdering av mesofila aerober i strandvatten..

På detta sätt kan den verkliga föroreningsnivån som vattnet har med dessa mikroorganismer uppskattas, eftersom resultaten i denna typ av prover överlappar när odlingsmedier som framställts på konventionellt sätt används..

Detta demonstrerades av Cortez et al. 2013 i ett forskningsarbete.

Detta kan förklaras på grund av den plötsliga förändring som bakterier genomgår när de går från en hypersaltad miljö till en saltfattig miljö, därför kommer mikroorganismerna in i ett tillstånd av slöhet där de är livskraftiga men inte odlingsbara..

Referenser

  1. "Näringsagar." Wikipedia, den fria encyklopedin. 13 sep 2016, 20:33 UTC. 29 dec 2018, 21:04 en.wikipedia.org
  2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnos. 12 utgåva Argentina. Redaktionellt Panamericana S.A.
  3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnos. (5: e upplagan). Argentina, Ledare Panamericana S.A.
  4. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Effekt av kulturmedier beredda med havsvatten på hälsoindikatorer i marina vatten i spa i Chichiriviche, Falcón, Venezuela. Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
  5. Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M och Cardoso M. Mikrobiologisk vattenkvalitet för inseminerande doser, för svin.Cient.Agro.Amaz. 2013; 1 (2): 42-49.
  6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Praktisk klinisk mikrobiologi. University of Cadiz, 2: a upplagan. UCA Publications Service.

Ingen har kommenterat den här artikeln än.