De selenitbuljong Det är ett selektivt flytande odlingsmedium. Det designades av Leifson för anrikning av prover där det finns misstanke om närvaron av enteropatogena bakterier av släktet Salmonella..
Detta medium uppfyller kraven från American Public Health Association (APHA) och godkänns därför för undersökning av förekomsten av Salmonella i prover av avföring, urin, flytande eller fast mat, vatten, bland andra..
Dess kemiska sammansättning gynnar återhämtningen av dessa mikroorganismer och hämmar i sin tur andras tillväxt. Det är främst giftigt för de flesta bakterier som tillhör Enterobacteriaceae-familjen. Men det tillåter också återhämtning av Shigella-stammar och hämmar inte tillväxten av Pseudomonas och Proteus..
Den består av vattenfritt natriumvätselenit, vattenfritt natriumfosfat, peptoner och laktos. Det finns också en variant som cystin tillsätts, därav namnet selenit-cystinbuljong..
För närvarande föredras användningen av selenit-cystinbuljong, eftersom en högre andel av Salmonella-återvinning erhålls, motsvarande den som observerats med andra selektiva medier för samma ändamål, såsom natriumtetrakionatbuljong..
Artikelindex
Peptonerna i buljongen tjänar som näringsämnen för korrekt utveckling av mikroorganismer. Salmonellastammar använder peptoner som en kvävekälla, vitaminer och aminosyror.
Laktos är den fermenterbara kolhydraten, medan natriumselenit är den hämmande substansen som stoppar tillväxten av Gram-positiva bakterier och de flesta bakterier som finns i tarmfloran, särskilt de av Enterobacteriaceae-familjen. Natriumfosfat är bufferten som stabiliserar mediumets pH.
När det gäller selenitbuljongvarianten som innehåller L-cystin är denna ytterligare förening ett reduktionsmedel som minimerar selenitoxicitet, vilket ökar återhämtningen av Salmonella..
Om du har komponenterna i blandningen kan du väga:
4 g vattenfri natriumvägselenit.
10 g vattenfritt natriumfosfat.
5 gram peptoner.
4 g laktos.
Lös upp föreningarna i 1 liter sterilt destillerat vatten. Den kan värmas upp något för att lösas upp helt.
Vissa laboratorier exponerar mediet i 10 minuter i flytande ånga för att sterilisera det, eftersom en autoklav inte bör användas. Om mediet steriliseras kan det förvaras i kylskåp tills det används..
Den kan också beredas icke-steril och serveras direkt 10 till 15 ml till sterila provrör.
I det här fallet bör det lämnas att vila och använda omedelbart. Eftersom mediet inte är sterilt kan det inte förvaras i kylen för senare användning..
Om det kommersiella mediet är tillgängligt, väger du 23 g av det uttorkade mediet och löser det i en liter sterilt destillerat vatten. Värm en kort stund för att lösa upp den. Autoklaver inte. Servera 10 eller 15 ml aseptiskt i sterila provrör.
Mediets slutliga pH måste vara 7,0 ± 0,2.
Det bör noteras att färgen på det dehydratiserade mediet är beige och beredningen är lätt och genomskinlig bärnsten..
Den innehåller samma föreningar som selenitbuljong, men 10 mg cystin tillsätts. Resten av proceduren är exakt densamma som beskrivits ovan.
Detta medium är speciellt att använda i epidemiologiska studier, i fall där sjukdomen inte är i sitt akuta stadium, asymtomatiska patienter eller friska bärare.
Isolering av släktet Salmonella är i allmänhet svårt, eftersom de normalt bara är dåligt förorenande prover. Eftersom det är i få mängder överlappas det lätt av tillväxten av andra bakterieslag som finns i större kvantitet..
Å andra sidan utsätts råmaterialet med vilket bearbetade livsmedel tillverkas ofta bland annat för värme, uttorkningsprocesser, användning av desinfektionsmedel, strålning och konserveringsmedel..
Därför missbrukas Salmonellas i råmaterialet genom att produkten utsätts för de ovannämnda industriella processerna. På samma sätt, när det gäller kliniska prover som avföring, kan stammarna vara svaga om de kommer från patienter som har behandlats med antibiotika..
Därför bör alla prov där det finns misstanke om närvaron av Salmonella förberikas i laktosbuljong och därefter anrikas i selenitbuljong för att optimera dess återhämtning i selektiva medier, såsom SS-agar, xylosagar, lysindoxicholat (XLD), enterisk Bland annat Hektoen agar (HE) och ljusgrön agar.
För avföringsprover, ta 1 g prov och suspendera i ett rör med 10 till 15 ml selenitbuljong. Om avföringen är flytande, ta 1 ml och häll i buljongen. För rektala svabbar, släpp ut torkmaterialet i buljongen.
I fasta matprover ta 1 gr och suspendera i selenitbuljongen.
Blanda i flytande livsmedel i lika delar med selenitbuljongen i dubbel koncentration.
För urinprover, centrifugera, kassera supernatanten, ta allt sediment och suspendera det i selenitbuljongen..
Buljongerna inkuberas vid 37 ° C under 24 timmars inkubation. Bakterietillväxt framgår av grumlighet. Ytterligare ett rör per prov kan också inkluderas för inkubation vid 42 ° C. Därefter såddes selektiva fasta medier från selenitbuljongen.
För att kontrollera steriliteten inkuberas en selenitbuljong från varje oinokulerad sats vid 37 ° C under 24 timmar. Ingen grumlighet eller färgförändring av mediet förväntas..
För att kontrollera att mediet fungerar korrekt kan kända stammar användas, såsom:
Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 och Proteus mirabilis ATCC 43071.
De förväntade resultaten är:
Selenitbuljongmedium är giftigt för människors hud, därför bör direkt kontakt undvikas..
Ingen har kommenterat den här artikeln än.