De medium Stuart Det är en halvfast agar eller en buljong utan näringsämnen som används för transport av biologiska prover. Syftet är att hålla stammarna närvarande i provet livskraftiga under en viss tid, men utan att öka den mikrobiella populationen.
Det skapades av Moffet, Young och Stuart 1948 och senare modifierat av Toshach och Patsula. Den består av natriumglycerofosfat, natriumtioglykolat, kalciumklorid och agar-agar. Den senare är närvarande i det halvfasta mediet och frånvarande i vätskan. Vissa laboratorier tillsätter metylenblått.
De används vanligtvis när det inte är möjligt att så omedelbart. I detta fall placeras provet i transportmediet medan det överförs till laboratoriet som kommer att bearbeta odlingen..
På detta sätt garanteras det att de närvarande mikroorganismerna förblir levande tills de inokuleras i motsvarande odlingsmedium..
Ursprungligen var användningen avsedd att transportera urinrörs- eller vaginalprover där förekomsten av Neisseria gonorrhoeae. Senare insåg de att dess användbarhet kunde vara bredare.
Stuart-mediet visade sig vara mycket effektivt för att bevara labila och snabba mikroorganismer såsom Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertussis, bland andra. Förutom andra icke-störande mikroorganismer såsom Enterobacteria.
Stuart-mediet undviker i princip uttorkning av provet, bibehåller den osmotiska balansen och håller mikroorganismerna vid ett idealt pH. Å andra sidan innehåller detta medium strategiskt inte näringsämnen och förhindrar därmed mikroorganismer från att föröka sig.
På marknaden finns det speciella provtransportanordningar som innehåller detta eller annat transportmedel, kallat culturette. De kan också beredas i laboratoriet.
Artikelindex
Syftet med Stuart-transportmedlet är att hålla proverna så nära sitt ursprungliga tillstånd tills de bearbetas..
Natriumglycerofosfat och kalciumklorid är ett buffersystem som fungerar genom att upprätthålla pH och osmolaritet..
Under tiden verkar natriumtioglykollat som ett reduktionsmedel och i fallet med innehållande agar ger detta en halvfast konsistens för att fördröja syresättningen av mediet. Slutligen är metylenblått en oxidationsindikator, det vill säga den detekterar närvaron av syre.
Det halvfasta mediet med redoxindikator är perfekt för transport av prover där det finns misstänkt förekomst av anaeroba bakterier.
Stuart-mediet uppfyller, liksom alla transportmedel, vissa egenskaper, inklusive:
-Upprätthåller livskraftiga mikrobiella stammar närvarande utan att föröka sig.
-Innehåller inga näringsämnen; Dess föreningar syftar till att hålla provet hydratiserat, under adekvata pH- och osmolaritetsförhållanden.
-Hämmar autolyzatet av vissa känsliga mikroorganismer, såsom Pneumococcus.
-Användningen är tillfällig, den bör inte förlängas för länge.
Natriumglycerofosfat 10 gr
Natriumtioglykollat 1,0 gr
Kalciumklorid 0,1 gr
Metylenblått 0,002 gr
Agar-agar 3 gr
Destillerat vatten 1 liter
Blanda komponenterna och värm tills de är helt upplösta. Häll i rör eller specialpinnar. De införs i autoklaven och steriliseras vid 121 ° C i 15 minuter. Låt rören svalna i upprätt läge (i form av en plugg). Förvara vid rumstemperatur.
Väg 14,1 g av mediet i 1 liter destillerat vatten. Värm omrörning ofta tills den är helt upplöst, den kan kokas. Resten av proceduren som redan beskrivits.
Det uttorkade mediet är krämfärgat och berett bör vara blått på ytan. Detta beror på närvaron av metylenblått.
Mediets pH måste justeras till 7,4 ± 0,2
Ingredienser
Natriumglycerofosfat 10 gr
Natriumtioglykolat 1 gr
Kalciumkloriddihydrat 0,1 gr
Destillerat vatten 1000 ml
Den har samma ingredienser som den halvfasta men den har inte agar eller metylenblått. I detta fall blandas komponenterna utan uppvärmning och 0,5 ml fördelas i 16 x 125 mm rör med skruvlock..
Den steriliseras i en autoklav vid 121 ° C i 10 minuter. För provtagning ska dacron-pinnprover användas om provet är för PCR eller rayon om det är för odling.
Rören lagras vid rumstemperatur.
Kommersiellt finns det speciella provtransportanordningar som kallas culturette; Enheten är ett långsträckt och tunt rör som har en vattpinne inuti och i slutet finns det ett segment som innehåller det halvfasta eller flytande Stuart-mediet.
Enheten öppnas och provet tas med pinnen. Det införs sedan tillbaka i röret tills spetsen på pinnen sätts in i det halvfasta transportmediet; vissa tar med en polyuretansvamp impregnerad med flytande Stuart-medium, med vilket provet konserveras genom att hålla det vått.
Om det misstänks förekomst av känsliga mikroorganismer, bör bomullspinnar med kol användas för att samla provet..
Proverna som kan tas med pinnprover eller vattpinnor och överföras i detta medium är svalgutsöndringar, rektala pinnprover och olika utsöndringar, inklusive: vaginal, urinrör, sår, öga, öra och abscess..
Under överföringen av provet i transportmediet till laboratoriet måste det undvikas att utsätta mediet för extrema miljöförhållanden (för kallt eller för varmt). Plötsliga förändringar i atmosfärstrycket bör också undvikas.
Tiden under vilken mediet kan hålla en mikroorganism livskraftig beror på den ifrågavarande stammen. Till exempel, för mikroorganismer av släktet Neisserias och Haemophilus, kan de förbli livskraftiga i upp till 24 timmar, men stammar som Salmonella eller Shigella kan pågå dagar och till och med veckor..
Om det uppskattas att bearbetningen av provet kan ta mer än fyra dagar är det föredraget att frysa provet vid -70 ° C.
Det beredda transportmedlet eller den kommersiella kulturen måste ha en etikett där följande information kommer att placeras:
Patientens för- och efternamn: undvik provförvirring.
Identifieringsnummer: det är bekvämt att hålla en beställning på jobbet.
Exempel på insamlingskälla: hjälper bakteriologen att välja lämpligt odlingsmedium.
Behandlande läkare: Ibland är det nödvändigt för eventuella samråd.
Provtagningsdatum och -tid: Det är nödvändigt för godkännande eller avstötning av provet enligt den tid som gått mellan att ta provet och ta emot det i laboratoriet..
Annan information som skulle vara mycket användbar att bifoga är:
Den förmodade diagnosen: vägledningar i tillägg av speciella odlingsmedier enligt diagnostisk misstanke.
Antibiotikabehandling: det är användbart att vara fäst vid antibiogrammet.
All denna information är viktig för att garantera en god bearbetning av provet..
För att utvärdera prestanda för Stuart-mediet kan kända stammar inokuleras och hållas vid 25 ° C, såsom: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae ATCC 6301.
I samtliga fall förväntas den återhämta mikroorganismen i fråga, bevarad i 24 timmar..
Å andra sidan kan andra stammar användas såsom: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 och Escherichia coli ATCC 11775.
I alla fall förväntas riklig återhämtning i upp till 96 timmar..
Vissa studier försäkrar att glycerofosfatet som finns i Stuart-mediet kan metaboliseras av vissa koliforma ämnen, bland andra gramnegativa bakterier och därför multipliceras i detta medium..
Denna risk ökar ju längre provbehandlingen är försenad. På samma sätt påverkar exponeringen av Stuart-mediet för höga temperaturer under dess överföring just detta.
Ingen har kommenterat den här artikeln än.