De nefelometri består av att mäta strålningen som orsakas av partiklar (i lösning eller i suspension) och därmed mäta effekten av den utspridda strålningen i en annan vinkel än riktningen för den infallande strålningen.
När en upphängd partikel träffas av en ljusstråle finns det en del av ljuset som reflekteras, en annan del absorberas, en annan avböjs och resten överförs. Det är därför när ljuset träffar ett transparent medium där det finns en suspension av fasta partiklar, verkar suspensionen grumlig..
Artikelindex
I det ögonblick då en ljusstråle träffar partiklarna i ett ämne i suspension, ändras strålens fortplantningsriktning. Denna effekt beror på följande aspekter:
1. Partikelns mått (storlek och form).
2. kännetecken för suspensionen (koncentration).
3. våglängd och ljusintensitet.
4.Oavsiktligt ljusavstånd.
5.detekteringsvinkel.
6. brytningsindex för mediet.
Nephelometern är ett instrument som används för att mäta suspenderade partiklar i ett flytande prov eller i en gas. Så en fotocell placerad i en 90 ° vinkel mot en ljuskälla detekterar strålning från partiklar som finns i suspensionen..
Det ljus som reflekteras av partiklarna mot fotocellen beror också på partiklarnas densitet. Diagram 1 presenterar de grundläggande komponenterna som utgör en nefelometer:
Inom nefelometri är det mycket viktigt att ha en strålningskälla med hög ljusflöde. Det finns olika typer, allt från xenonlampor och kvicksilverånglampor, volframhalogenlampor, laserstrålning, bland andra..
Detta system är beläget mellan strålningskällan och kyvetten, så att strålning med olika våglängder jämfört med önskad strålning på kyvetten undviks på detta sätt..
I annat fall kan fluorescensreaktioner eller värmeeffekter i lösningen orsaka avvikelser från mätningen..
Det är en generellt prismatisk eller cylindrisk behållare och den kan ha olika storlekar. I detta hittar du lösningen som studeras.
Detektorn är belägen på ett specifikt avstånd (i allmänhet mycket nära kyvetten) och ansvarar för att detektera strålningen spridd av partiklarna i suspensionen..
Generellt är det en elektronisk maskin som tar emot, konverterar och bearbetar data, som i detta fall är de mätningar som erhållits från den genomförda studien..
Varje mätning är föremål för en procentandel av fel, som huvudsakligen ges av:
Förorenade kyvetter: i kyvetterna minskar alla medel utanför lösningen som studeras, oavsett om det är inom eller utanför kyvetten, det strålande ljuset på vägen till detektorn (defekta kyvetter, damm vidhäftar till kyvettens väggar).
Interferens: närvaron av någon mikrobiell förorening eller grumlighet sprider strålningsenergin, vilket ökar dispersionsintensiteten.
Fluorescerande föreningar: dessa är de föreningar som, när de exciteras av infallande strålning, orsakar felaktiga och höga spridningsdensitetsavläsningar.
Lagring av reagens: felaktig systemtemperatur kan orsaka ogynnsamma studieförhållanden och skulle uppmuntra närvaron av grumliga eller utfällda reagens.
Fluktuationer i elkraft: För att förhindra att infallande strålning är en felkälla rekommenderas spänningsstabilisatorer för enhetlig strålning.
Eftersom strålningseffekten för den detekterade strålningen är direkt proportionell mot partiklarnas masskoncentration, har nefelometriska studier-i teorin- en högre metrologisk känslighet än andra liknande metoder (såsom turbidimetri).
Dessutom kräver denna teknik utspädda lösningar. Detta gör att både absorptions- och reflektionsfenomen kan minimeras..
Nephelometric studier har en mycket viktig position i kliniska laboratorier. Applikationerna sträcker sig från bestämning av immunglobuliner och akuta fasproteiner, komplement och koagulation.
När ett biologiskt prov innehåller ett antigen av intresse blandas det (i en buffertlösning) med en antikropp för att bilda ett immunkomplex..
Nephelometry mäter mängden ljus som sprids av antigen-antikroppsreaktionen (Ag-Ac) och på detta sätt detekteras immunkomplex.
Denna studie kan utföras med två metoder:
Denna teknik kan användas för slutpunktsanalys, där antikroppen i det studerade biologiska provet inkuberas i tjugofyra timmar..
Ag-Ac-komplexet mäts med en nefelometer och mängden spridd ljus jämförs med samma mätning som utfördes innan komplexet bildades..
I denna metod övervakas kontinuerligt komplexbildningshastigheten. Reaktionshastigheten beror på koncentrationen av antigenet i provet. Här görs mätningarna som en funktion av tiden, så den första mätningen görs vid tiden "noll" (t = 0).
Kinetisk nefelometri är den mest använda tekniken, eftersom studien kan genomföras på en timme, jämfört med slutpunktmetodens långa tidsperiod. Dispersionsförhållandet mäts strax efter tillsats av reagenset.
Så länge som reagenset är konstant anses därför mängden antigen närvarande vara direkt proportionell mot förändringshastigheten.
Nephelometry används vanligtvis vid analys av vattenkemisk kvalitet, för att bestämma klarhet och för att kontrollera dess behandlingsprocesser..
Det används också för att mäta luftföroreningar, där partiklarnas koncentration bestäms utifrån den dispersion som de producerar i ett infallande ljus..
Ingen har kommenterat den här artikeln än.