Kongo röda egenskaper, förberedelser och applikationer

4165
Basil Manning

De Kongo röd är ett azofärgämne för proteiner, bildat genom koppling av ett diazoniumsalt och en aktiv aromatisk ring. Detta ämne kan absorbera elektromagnetisk strålning i det synliga spektrumet, varför det har en intensiv färg.

Det är negativt laddat. Därför har den en affinitet för positivt laddade cellulära komponenter, såsom vissa proteinsubstanser. Dess färg varierar beroende på pH. I denna mening, om mediet är surt (< de pH3), el color es azul intenso. Entre pH3 - pH 5,2 es fucsia (zona de viraje), y con >pH 5,2 är färgen djupt röd.

Dehydratiserad Kongo Röd och Kongo Röd kolloidal lösning. Källa: Pixinio.com och Wikipedia.com

Det är ett mycket mångsidigt ämne, eftersom det har flera användningsområden. Det har använts som färgämne i textilindustrin och även för celler och tyger.

Också att utföra odlingsmedier som mäter enzymatisk verkan, som en pH-indikator, som ett kontrollämne vid utvärderingen av att spektrofotometrar fungerar korrekt, vid studier av biofilmbildning eller vid diagnos av amyloid..

På samma sätt har det gjort det möjligt att skilja bakterie- och svampserotyper genom att identifiera specifika strukturer i deras vägg (lipopolysackarider)..

Artikelindex

  • 1 Egenskaper för Kongoröd
  • 2 Förberedelse
  • 3 applikationer
    • 3.1 Som färgämne i textilindustrin
    • 3.2 Bestämning av biofilmbildningskapacitet
    • 3.3 Kvalitetskontroll av spektrofotometrar
    • 3.4 Beredning av odlingsmedier
    • 3.5 Identifiering av mikroorganismer
    • 3.6 Cell- och vävnadsfärgning
    • 3.7 Som pH-indikator
  • 4 Referenser

Egenskaper för Kongo-rött

Detta ämne upptäcktes av Böttiger 1884. Det är ett diazoniumderivat bildat av bis-diazoinsyra av bensidin med naftionsyra. Den Kongo-röda molekylen mäter 21 Armstrong och molekylvikten är cirka 8000 g / mol..

Kongo-rött kännetecknas av att vara lösligt i vatten och ännu mer i organiska lösningsmedel som etanol och bildar en kolloidal lösning.

Har en affinitet för cellulosa, amyloidvävnad och positivt laddade cellulära komponenter.

Förberedelse

Congo Red bereds i olika koncentrationer beroende på vilken teknik som ska användas. De flesta använder Kongo-rött bland annat 1%, 2%, 0,1%.

Till exempel, för att förbereda 2% Kongo-rött, bör 2 g uttorkad livsmedelsfärgning vägas och 100 ml destillerat vatten tillsättas. Sedan lagras den i en gul flaska.

Applikationer

Som färgämne i textilindustrin

Under en tid användes den i stor utsträckning i textilindustrin på grund av dess fixering på bomull, men för närvarande är den i nedlagd form eftersom den är cancerframkallande och också för att färgen inte är stabil och missfärgas av friktion..

Bestämning av biofilmbildningskapacitet

Den biofilmbildande kapaciteten hos mikroorganismer har visat sig vara en virulensfaktor.

I denna mening används Kongo-rött färgämne som en metod för att bestämma bildandet av biofilm. Kongo-rött binder till de exopolysackarider som finns i biofilmen. Men jämfört med andra metoder rekommenderas det minst på grund av de höga falska negativen som uppstår.

Metoden använder Kongo röd agar, den består av blodagar som bas, glukos (10 g / l) och Kongo rött färgämne (0,4 g / l). Stammarna som ska utvärderas såddes i mediet och inkuberades under 24 timmar vid 37 ° C och inkuberades därefter i 48 timmar vid rumstemperatur..

Ett positivt test bevisas om kristallina kolonier av svart färg och torrt utseende observeras.

Kvalitetskontroll av spektrofotometrar

För att bedöma om en absorbans- eller transaktionsmätutrustning överensstämmer med de fotometriska parametrar som fastställts av internationella regler, kan en enkel teknik användas för att fastställa om utrustningen avger resultat inom acceptansintervallet..

En av utvärderingsteknikerna är att använda Kongo-rött, baserat på isosbestic-punkten.

Den isosbestande punkten är den våglängd vid vilken Kongo-rött avger samma absorbans oberoende av pH, koncentration och temperatur. Absorbansvärdet är fast och kan användas som referens.

Den teoretiska isosbestic-punkten för Kongo-röd är känd för att vara 541 nm. Om det erhållna värdet är annorlunda är det känt att utrustningen har våglängdsdriftproblem och den måste kontrolleras av en specialiserad tekniker..

Beredning av odlingsmedier

Ortiz et al. Beskriv ett odlingsmedium framställt med Kongo-rött färgämne och karboximetylcellulosa kallat CMC-agar för att detektera mikrobiella stammar av celluliter; dvs cellulasproducenter (endoglukoneser, exoglukanaser och ß-glukosidas).

Detta medium har en intensiv färg. Färgen kommer att försvinna genom verkan av endoglukanasenzymet som bryter strukturen av karboximetylcellulosa. Detta antyder en positiv reaktion.

Minskningen i viskositet och absorbans gör det möjligt att kvantifiera enzymets aktivitet. Till exempel i stammar av Streptomyces sp.

Identifiering av mikroorganismer

Kongo-rött har en affinitet för polysackaridstrukturer av vissa stammar, vilket uppnår identifiering av dessa mikroorganismer. Bland dem är Escherichia coli, och den Shigella flexneri.

Kongo röda agarplattor används också för att erhålla karakteristiska kolonier, vilket är fallet med  Azospirillum sp, ger scharlakansröda kolonier, bland annat.

Cell- och vävnadsfläck

En av de vanligaste användningarna av Kongo-röd är dess användbarhet vid diagnos av amyloidos. Denna konstiga sjukdom består av den extracellulära ackumuleringen av ett onormalt protein i olika organ. Detta onormala protein tillverkas i benmärgen och kallas amyloid..

Kongo-rött har hög affinitet för detta ämne. Denna egenskap har använts för att visa sin närvaro i histologiska vävnadsavsnitt. Kongo Red används i kombination med hematoxylin / eosin för detta ändamål..

Föreningen av amyloidvävnaden och Kongo-rött sker genom icke-polära vätebindningar mellan karboxylgrupperna och aminogruppen. Amyloidprotein ger karboxylgrupperna (COOH) och Kongo-röda aminogruppen.

Amyloidvävnad färgas i olika nyanser, allt från rosa till djuprött under ljusmikroskopet. I mikroskop med dubbelpolariserat ljus observeras dessa preparat med en patognomonisk äppelgrön dubbelbrytning..

Det vill säga de presenterar dikroism, eftersom amyeloida fibrer är anisotropa. Denna observation bekräftar diagnosen.

Vävnadsfärgning med Kongorött är kompatibel med andra diagnostiska metoder, såsom immuncytokemiska metoder, och det är till och med möjligt att färga om.

Som pH-indikator

Egenskapen att vända sig mot förändringar i pH används av tekniken som kallas kromendoskopi..

Denna teknik använder färgämnen och pH-indikatorer som gör det möjligt att upptäcka vissa patologier. Bland dem är användningen av Kongo-rött, vilket kan avslöja tidiga cancerfoci i magslemhinnan, som används som en markör för surhet.

Tekniken bygger på det faktum att Kongo-rött vid surt pH är svart. Efter att ha placerat en lösning av Kongoröd på magslemhinnan kommer de områden där det finns blekhet att väljas att ta provet för biopsi, det vill säga där det inte finns någon syraproduktion. Detta antyder förekomsten av cancerfokus eller förlust av parietala celler..

Referenser

  1. "Kongoröd." Wikipedia, den fria encyklopedin. 8 maj 2019, 12:13 UTC. 16 maj 2019, 04:08, es.wikipedia.org.
  2. Ortiz M, Uribe D. Ny metod för kvantifiering av endoglukanasaktivitet baserat på cellulosa-Kongo-röda komplexet. Orinoquia [Internet]. 2011 juni [citerad 2019 15 maj]; 15 (1): 7-15. Tillgänglig från: scielo.org.
  3. Peña J, Uffo O. Biofilmproduktion i genotyper av Staphylococcus aureus isolat av bovin mastit på Kuba. Rev Salud Anim. [Internet]. 2013 dec [citerad 16 maj 2019]; 35 (3): 189-196. Finns på: scielo.s
  4. Fich F, Chahuán M, Farías M, Cárdenas C, Abarzúa A, Araya G et al. Kutana manifestationer av systemisk amyloidos som diagnostisk nyckel: Kliniskt fall. Pastor medic. Chile [Internet]. 2012 apr [citerad 16 maj 2019]; 140 (4): 499-502. Finns i: scielo.
  5. Duymovich C, Acheme R, Sesini S, Mazziotta D. Spektrofotometrar och fotokolorimetrar Praktisk uppdateringsguide. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana [online] 2005, 39 (september-december): [Datum konsulterat: 15 maj 2019] Tillgängligt på: redalyc.org
  6. Marín J, Díaz J och Solís J. Chromoendoscopy i infektion av Helicobacter pylori: Är det reaktionstid? Rev Esp Enferm Dig 2012; 104 (1): 1-3
  7. Fieser L, Fieser M. 1985. Organisk kemi. Redaktionellt Reverté. Barcelona, ​​Spanien. Tillgänglig på: books.google.co.ve
  8. Murillo M. Histologiska vävnadsfärgningstekniker. University of Guadalajara, Mexiko. Tillgänglig på: academia.edu
  9. Paillié M. Bestämning av cellulolytisk, ligninolytisk och amylolytisk aktivitet av Actinobacteria isolerad från rhizosfärisk jord av vitklöver (Trifolium repens) .2012. Pontificia Universidad Javeriana Naturvetenskapliga fakulteten Industriell mikrobiologi Bogotá D.C. Tillgänglig på: repository.javeriana.edu.co
  10. Cárdenas, D, Garrido M, Bonilla R och Baldani V. Isolering och identifiering av stammar av Azospirillum sp. i guinea gräsPanicum maximalt Jacq.) i Cesar Valley. Betesmarker och foder, 2010; 33 (3): 1-8 Finns i: scielo.

Ingen har kommenterat den här artikeln än.