Bengalros Det är ett laboratorietest baserat på en antigen-antikroppsreaktion för diagnos av brucellos. Tekniken möjliggör detektering av specifika antikroppar mot bakterierna Brucella abortus i humana serumprover. Resultatet kan rapporteras kvalitativt eller halvkvantitativt.
Den kvalitativa formen uttrycker om patienten är positiv eller negativ för testet, det vill säga om det finns antikroppar eller inte. Under tiden rapporteras den semikvantitativa rapporten i IE / ml och anger den ungefärliga mängden närvarande antikroppar. Det bör noteras att antikroppar endast kommer att produceras om patienten har varit i kontakt med mikroorganismen.
På grund av sin stora enkelhet, höga känslighet och specificitet är det en av de seroagglutinationstekniker som används mest inom medicin som ett första test för diagnos av denna sjukdom..
Vissa forskare har jämfört effekten av Rose Bengal-testet med andra tekniker, såsom seroagglutination (feberantigener) och har observerat att även om det finns god korrelation såg de isolerade fall där febernantigen-testet var negativt och Rose de Positive flare.
Den erhållna skillnaden berodde på det faktum att dessa patienter hade en underklass av IgG-antikroppar mot Brucella abortus med bättre bindningskapacitet vid surt pH, därför kunde de reagera med Rose Bengal-reagenset men inte med feberantigenernas.
I den meningen har de föreslagit att reagenserna i febernantigentekniken modifieras till ett surt pH så att de kan upptäcka denna typ av fall..
Artikelindex
Rose Bengal Reagent består av en antigen suspension. Den består av S99-stammen av Brucella abortus, spädd i en sur laktatbuffert (pH 3,6), plus fenol och Rose Bengal-färgämnet.
Därför är det i provet som man letar efter anti-Brucella-antikroppar, om dessa är närvarande kommer de att reagera med reagensantigenet och en makroskopiskt synlig agglutinationsreaktion kommer att observeras. Testet upptäcker antingen IgM-antikroppar eller IgG-antikroppar.
Detta innebär att den kan upptäcka sjukdomen både i sitt akuta stadium där IgM-antikroppar råder eller i dess kroniska stadium där IgG-antikroppar dominerar..
Detta representerar en fördel eftersom det ökar testets känslighet men samtidigt är det en nackdel eftersom det inte diskriminerar mellan ett steg och ett annat, eftersom reaktionen med IgM och IgG-antikroppar är identiska.
Testet måste alltid utföras tillsammans med en negativ kontroll och en positiv kontroll. Den negativa kontrollen innehåller animaliskt serum utan antikroppar och den positiva kontrollen innehåller serum av animaliskt ursprung med 50 IE / ml anti-Brucella-antikroppar..
Brucellos är en allvarlig sjukdom som tenderar att vara kronisk och farlig, så det är mycket viktigt att den diagnostiseras tidigt. Det är en zoonos och människor kan smittas genom direkt kontakt med förorenat material, de mest utsatta människorna är veterinärer och djurhållare.
Infektion kan också inträffa genom att konsumera infekterat rå kött, bland andra former av smitta.
Denna sjukdom attackerar lokalt eller systemiskt. Den systemiska formen är den allvarligaste, eftersom olika organ kan påverkas, inklusive endikelsystem i retikulum (lever, mjälte, benmärg), hud (cellulit och lymfadenopati), andningsorgan (lunginflammation), muskuloskeletala systemet (artrit, sakroiliit och spondylit ), bland andra.
Rose Bengal-testet är en mycket användbar teknik för att utföra en första screening, eftersom det är mycket billigt, lätt att använda och med stor specificitet och känslighet..
Fall av falska negativa och falska positiva effekter är mycket sällsynta och kan förekomma hos personer med mycket låga antikroppstitrar (< 25 UI/ml) o extremadamente altos (>1000 IE / ml).
-Rose Bengal Kit
-Agglutination plattan vit bakgrund
-50 | il pipett
-Rotator (tillval)
-Virvel
Kommersiella Rose Bengal Kits levereras med färdiga reagens.
-Temperera reagenser innan du börjar arbeta.
-Agglutinationsplattorna har ritade cirklar, var och en för ett annat prov. Använd tre cirklar, den första för den negativa kontrollen, den andra för provet och den tredje för den positiva kontrollen.
-Placera en droppe eller 50 µl av kontrollerna och provet i motsvarande cirkel.
-Blanda Rose Bengal Reagent med en virvel. Placera en droppe bredvid de tidigare placerade.
-Blanda med trätandpetare (använd en för varje prov eller kontroll). Gör cirkulära rörelser och sprid så att det täcker hela cirkeln.
-Placera plattan på en automatisk rotator vid 80 till 100 varv per minut eller rotera manuellt i 4 minuter. Läs beviset i slutet av denna tid.
-Kontrollera att kontrollerna gav som förväntat. Jämför testprovets reaktion med kontrollerna. Rapportera som positivt om agglutination observeras och som negativt om det inte finns någon agglutination.
Ett positivt test indikerar att patienten har en mängd som är lika med eller större än 25 IE / ml antikroppar mot Brucella.
Om provet i den kvalitativa reaktionen är starkt positivt kan det kvantifieras. För detta görs dubbla utspädningar av provet med fysiologisk saltlösning. Förfarandet som beskrivs ovan utförs med varje utspädning..
Det tolkas också genom att observera agglutinationen makroskopiskt. Resultatet blir titern för den högsta utspädningen där ett positivt resultat observerades.
För att beräkna det ungefärliga värdet av anti-Brucella-antikroppar används följande formel:
25 IE / ml x reaktionstiter = IE / ml
Exempel, om en patient i det halvkvantitativa testet testar positivt vid utspädningen ½, ¼ och 1/8 och börjar vara negativ från 1/16 utspädningen och framåt, betyder det att patienten har en titer på 8.
Tillämpa formeln:
25 IE / ml x 8 = 200 IE / ml
-Satserna har ett utgångsdatum och det måste respekteras. Bör inte användas om reagenset har gått ut.
-Se till att reagenset inte innehåller fasta partiklar under användning, eftersom detta är ett tecken på försämring..
-Förvara mellan 2 och 8 ° C.
-Frys inte, denna handling skadar reagenset irreparabelt.
-Kör alltid testet tillsammans med de negativa och positiva kontrollerna.
-Tekniken tolererar serumprover med en viss grad av lipemi och hemolys, men det är inte tillrådligt att använda överdrivet lipemiskt och hemolyserat sera, båda förhållandena förändrar testresultaten..
-Värm alltid reagensen till rumstemperatur innan analysen påbörjas..
-Tolk inte reaktioner som tar mer än den rekommenderade tiden, eftersom detta genererar rapporter om falska positiva resultat, eftersom reagenset efter en viss tid fälls ut och simulerar en positiv reaktion.
-Tekniken är 100% känslig och har en specificitet på 98%.
-Efter en halvkvantifiering av 1000 IE / ml finns möjligheten att observera en prozoneffekt (falskt negativ på grund av överskott av antikropp jämfört med mängden antigener).
Ingen har kommenterat den här artikeln än.