De safranin Det är en meriquinoid färgämne, namngiven för att i sin kemiska struktur ha 2 bensenoidringar och 2 quinoidringar, den senare är de som ger den röda färgen.
Det kallas också dimetylsafranin eller basiskt rött 2 i sin korta form, eftersom dess vetenskapliga namn är 3,7-diamino-2,8-dimetyl-5-fenyl-fenaziniumklordimetylsafranin och den kemiska formeln är CtjugoH19N4 Cl.
Det finns en variant som kallas trimetyl-safranin men det finns ingen signifikant skillnad mellan de två ämnena.
Safranin är ett monokromatiskt färgämne och beroende på egenskaperna hos den kemiska formeln är det ett positivt laddat ämne. Därför har den en affinitet för negativt laddade strukturer. Dessa strukturer kommer att färgas rött.
Denna egenskap gör det tillämpligt i många histologiska tekniker för att färga olika cellulära strukturer, både i eukaryota och prokaryota organismer..
Safranin används som kontrastfärgämne i viktiga och välkända tekniker för rutinmässig användning inom bakteriologi. Dessa tekniker är: Gram-Hucker-fläcken, Schaeffer Fulton-fläcken för sporer eller färgning av bakteriekapslar, bland andra..
Artikelindex
Safranens färg (en krydda som erhållits från blommorna från blomman från Crocus sativus) var inspirationen att namnge denna färg. Från begreppet saffran kommer namnet safranin. Detta beror på den stora likheten mellan saffranfärgen och den färg som detta färgämne ger..
Safranin erhålls som kristaller eller i pulver, båda presentationerna är lösliga i vatten. Safraninfärgämnet är luktfritt. Fläckar strukturer röda. Strukturerna som lockar safraninfärgning kallas safranofiler..
Strukturellt är safranin komplicerat, det har två bensenoidringar i ändarna och i mitten är de två quinoidringarna där N-katjonen finns.+. Mitten av strukturen är det system som ansvarar för att ge färgen. På grund av denna egenskap klassificeras detta färgämne inom kategori II..
Safranin används för att fläcka olika strukturer. Framhäver särskilt Kulchitsky-cellerna i mag-tarmkanalen, även kallade enterokromaffinceller.
Den kan färga mikroorganismer som tillhör familjen Rickettsiaceae. På samma sätt används den i olika tekniker, såsom Koster-metoden, en modifierad som används för färgning av bakterier i släktet Brucella.
Å andra sidan används safranin i Schaeffer Fultons sporfärgningsteknik och i Gram-Hucker-färgning. I båda teknikerna fungerar safranin som kontrastfärg.
I det första tar sporerna färgen på malakitgrönt och resten av strukturerna är röda av safranin. I det andra förlorar de gramnegativa bakterierna färgen på den violetta kristallen i missfärgningssteget, därför är safranin den som fläckar de gramnegativa bakterierna röda.
Dessutom används safranin i bakteriologi för att bereda Brucella agar media med en 1: 5000 utspädning av safranin. Detta medium tjänar till att differentiera arten Brucella suis av resten av arten. Brucella melitensis Y Brucella abortus de växer i denna miljö men B. suis hämmas.
På det agroindustriella området har safranin använts med 2,25% och spätt 1:10 för att fläcka stamprover av sockerrörsanläggningen..
Denna växt påverkas vanligtvis av bakterierna Leifsonia xyli subsp. xyli, som skadar växtens xylem. De färgade stjälkarna utvärderas för att bestämma funktionen hos xylemkärlen..
Ett blod- eller vävnadsutstryk placeras i en buffertlösning (fosfatbuffert pH 7,6). Den får torka spontant och täcks sedan med metylenblått i 3 minuter och motfärgas med safranin. Rickettsiae är blå färgade, kontrasterande med den röda bakgrunden.
Ett utstryk görs och flammas i tändaren för fixering. Därefter täcks den med en blandning av 2 delar vattenhaltigt safranin mättat med 3 delar 1 mol / L KOH-lösning under 1 minut. Det tvättas med destillerat vatten och motfärgas med 1% karbolisk metylenblått..
Om provet innehåller bakterier av släktet Brucella dessa visas orange på en blå bakgrund.
En blandning av bakteriesuspension görs med bläck från Indien och safranin tillsätts till den. Under mikroskopet kommer en rödaktig halo att observeras runt varje bakteriekapsel med svart bakgrund..
Ett utstryk görs med bakteriesuspensionen. Sedan fixas den för värme. Den är täckt med 5% malakitgrönt, flammar ofta tills ångor släpps ut. Processen upprepas i 6-10 minuter. Slutligen tvättas den med vatten och motfärgas med 0,5% safranin i 30 sekunder. Baciller fläckar röda och sporer gröna.
Ett utstryk görs med bakteriesuspension och fixeras på värme. Täck bilden med kristallviolett i 1 minut. Sedan placeras lugol som en mordant lösning i 1 minut. Därefter bleks den med acetonalkohol och slutligen motfärgas med safranin i 30 sekunder..
Grampositiva bakterier fläckar blålila och gramnegativa bakterier röda.
Vissa laboratorier har slutat använda Gram-Hucker-tekniken för att använda den modifierade Gram-Kopeloff-tekniken. I den senare ersätts safranin med grundläggande fuchsin. Detta beror på att safranin fläckar svagt arter av släktena Legionella, Campylobacter Y Brucella.
Vävnadsavsnitt från mag-tarmkanalen färgas med silverklorid. Det avfärgas sedan med natriumtiosulfat och motfärgas slutligen med safranin.
Kulchitsky-celler kännetecknas av närvaron av svartbruna granuler..
Eftersom safranin har en positiv laddning, binder det mycket bra till karboxyl- och sulfatgrupperna i glykosaminoglykaner. Dessa är en del av proteoglykanerna som utgör ledbrosket. I denna mening är det möjligt att identifiera om det finns förlust av brosk vid färgning med safranin O..
Förlusten av broskvävnad kan mätas med hjälp av Mankin-skalan eller även kallad artrosskalan..
Tekniken förklaras nedan: den histologiska sektionen sänks ned i en bricka med Weigerts järnhematoxylinlösning, passeras sedan genom sur alkohol och tvättas med vatten.
Fortsätt färgningsprocessen genom att doppa bilden i snabbt grönt, den tvättas med ättiksyra och nu doppas den i safranin O. För att avsluta processen dehydratiseras den med alkoholer i olika koncentrationer i stigande ordning. Det sista steget kräver att xylen eller xylol klargörs.
Objektglasen är konditionerade med Canada balsam eller liknande för att observeras under ett mikroskop..
Med denna teknik färgas kärnorna svarta, bengröna och brosket där proteoglykanerna finns röda.
Pérez et al 2003 föreslog en enkel och billig teknik för färgning av makroalger. Proverna bereds i parafinhistologiska sektioner. Sektionerna är fixerade med 1% glycerol, så att de kan torka helt. Den placeras sedan i xylol för att avlägsna paraffinet.
Avsnittet återhydratiseras genom att passera det genom en serie brickor innehållande etanol i olika grader av koncentration (fallande ordning), i 2 minuter i var och en..
Därefter färgas den i 5 minuter med en 3: 1-blandning av 1% safranin med 1% toluidinblått, båda framställda med 50% etanol. Tre droppar pikrinsyra tillsätts till blandningen, som fungerar som en mordant..
Sedan torkas det ut genom att gå igenom alkoholbrickorna igen, men den här gången på stigande sätt. Slutligen sköljs den med xylol och provet bereds med Canada balsam för att observeras..
Lyckligtvis är safranin ett färgämne som inte utgör någon fara för dem som hanterar det. Det är ett ofarligt färgämne, det är inte cancerframkallande och det är inte brandfarligt..
Direkt kontakt med huden eller slemhinnorna kan orsaka en lätt rodnad i området utan större komplikationer. För detta rekommenderas att tvätta det drabbade området med mycket vatten.
Ingen har kommenterat den här artikeln än.