De salt och mannitolagar eller salt mannitol är ett fast, selektivt och differentierat odlingsmedium. Det skapades av Chapman för isolering av patogena Gram-positiva kockar, särskilt Staphylococcus aureus.
Det är dock också användbart för isolering Staphylococus epidermidis, som ibland kan vara närvarande som en opportunistisk patogen, och Staphylococcus saprophyticus, erkänd urinpatogen, bland andra arter.
Vissa Enterococcus kan växa på detta medium, liksom vissa Gram-positiva sporbildande stavar..
Detta medium är mycket användbart vid analys av kliniska prover, men det används också i den mikrobiologiska studien av livsmedel och i kvalitetskontrollen av industriprodukter, såsom kosmetika, läkemedel, bland andra..
Salt mannitolagar består av extrakt och peptoner från nötkött, triptein, mannitol, natriumklorid, fenolrött och agar.
Artikelindex
Mannitolagar är selektiv tack vare sin höga saltkoncentration. Salthalt fungerar som ett hämmande ämne och förhindrar tillväxt av gramnegativa bakterier.
Det är också differentiellt på grund av närvaron av kolhydratmannitol och den fenolröda pH-indikatorn. Från detta producerar bakterier som kan fermentera mannitol syror, försurar mediet, gör kolonierna och mediet gula..
Å andra sidan växer kolonier som inte fermenterar mannitol i mediet och tar de näringsämnen som tillhandahålls av köttextrakt och peptoner och triptein. Därifrån extraherar bakterierna kol, kväve, vitaminer och mineraler som är nödvändiga för deras tillväxt..
Kolonierna kan i detta fall vara svaga eller starka rosa, och mediet förblir samma färg eller ändras till fuchsia.
Agar är det ämne som ger mediet konsistens.
För att framställa en liter salt mannitolagar vägs 111 g av det uttorkade mediet från det föredragna kommersiella företaget och löses i 1000 ml destillerat vatten med användning av en kolv..
Värme appliceras med frekvent omrörning av mediet för att förbättra upplösningsprocessen. Koka en minut.
Placera kolven i autoklaven vid 121 ° C i 15 minuter.
Vid tidens slut, ta bort kolven från autoklaven, låt den vila och servera mellan 15 och 20 ml på sterila petriskålar när temperaturen är cirka 50 till 55 ° C..
Det är tillåtet att stelna, beställa på inverterat sätt i placker och förvaras i kylskåp tills det används. Innan du sår ett prov, vänta tills plattan når rumstemperatur.
Plattorna sås genom strimmor eller genom ytsådd med en drigalski-spatel. Det slutliga pH-värdet för det beredda mediet måste vara 7,4 ± 0,2
Färgen på det uttorkade mediet är ljusbeige och färgen på det beredda mediet är orange rött.
På grund av sin höga selektivitet är detta medium idealiskt för sådd av prover med blandad flora där du vill leta efter närvaron av Staphylococus aureus, som den viktigaste patogenen i detta släkte.
I denna mening är en av dess vanligaste användningar i mikrobiologisk analys av svalgutsöndringar och nasal urladdningsprover, särskilt för att detektera asymptomatiska bärare av S. aureus.
Vissa länder har implementerat denna analys som ett obligatoriskt krav för människor som vill arbeta som livsmedelsförsäljare..
Denna kontroll förhindrar anställning av transportörer av S. aureus, och därmed undvika massiv matförgiftning, på grund av konsumtion av mat kontaminerad med stafylokock enterotoxin.
Det kan också inkluderas i sådd av sårinfektioner, blodkulturer, CSF, bronkoalveolär sköljning, bland andra.
Saltad mannitolagar är användbar för att återisolera kolonier från urinkulturer från CLED-agar eller blodagar vars gram har avslöjat grampositiva kockar i kluster..
Det gäller också i mikrobiologisk analys av mat, dricksvatten, jord, bland andra applikationer..
När ett parti plattor med salt mannitolagar har beretts, är det lämpligt att utföra en kvalitetskontroll. Kontrollstammar sås för att visa om det finns tillväxt av samma eller inte.
Som positiv kontroll, kända stammar av Staphylococcus aureus. Den ska växa tillfredsställande och utveckla gula kolonier, och mediet får också samma färg.
På samma sätt är det lämpligt att inkludera en känd stam av Staphylococcus epidermidis. Bör växa tillfredsställande och utveckla rosa kolonier, och mediet förblir i samma färg eller mörknar till en starkare rosa färg.
Som en negativ kontroll används stammar som inte bör växa på detta medium. Till exempel en känd stam av Escherichia coli eller Klebsiella pneumoniae. Det förväntade resultatet är fullständig hämning, det vill säga ingen tillväxt..
Dessutom måste en oinokulerad platta inkuberas. I den bör det inte finnas någon tillväxt eller färgförändring.
Det är viktigt att plattan inte används om det finns tecken på försämring, som bland annat förorening, uttorkning, missfärgning.
När du använder salt mannitolagarmedium finns det några viktiga aspekter att tänka på:
-Att få en tillväxt av gula kolonier indikerar inte att det är det Staphylococcus aureus. Man måste komma ihåg att vissa stammar av Enterococcus kan växa i detta medium och jäsa mannitol, liksom vissa Gram-positiva sporbildande stavar..
Därför är det viktigt att utföra ett gram på kolonin och ett katalastest..
-Å andra sidan måste det anses att andra arter av Staphylococcus än aureus de kan också jäsa mannitol. Därför är det viktigt att subkulturera kolonin till en näringsbuljong för att ta därifrån och utföra koagulastestet..
Bland de Staphylococcus-arter av klinisk betydelse för människan som jäser mannitol är: S. aureus, S. simulans, S. capitis ssp capitis, S. capitis ssp urealyticus, S. xylosus, S. cohnii ssp urealyticum, bland andra.
Andra kan ge en variabel reaktion, det vill säga ibland positiv och ibland negativ. Några är S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. warneri, S. intermedius, bland annat.
-Det rekommenderas inte att ta kolonier direkt från mannitolagar för att utföra koagulastestet, eftersom den höga saltkoncentrationen i mediet kan störa resultatet..
-Slutligen rekommenderas det att inkubera plattorna sådd med salt mannitol i upp till 48 timmar, eftersom vissa stammar av S. aureus kan långsamt jäsa mannitol, även om detta är sällsynt.
Ingen har kommenterat den här artikeln än.