De Tryptikasin sojagar eller Trypticase Soy Agar är ett fast, icke-selektivt och näringsrikt odlingsmedium. Det betecknas av bokstäverna TSA för dess akronym på engelska Trypticase Soy Agar. Den består av triptein, sojapepton, natriumklorid och agar-agar.
På grund av dess höga näringskraft är den idealisk för odling av måttligt krävande och icke-krävande mikroorganismer. Mediet utan ytterligare tillskott rekommenderas inte för primärkulturer, men det är mycket användbart för att odla rena stammar och hålla dem livskraftiga, bland andra användningsområden..
Denna agar tjänar också som en bas för beredning av anrikat medium såsom blodagar, speciellt när det krävs att observera hemolysmönstren och att montera optokin och bacitracin taxa, vilket krävs vid diagnosen av Streptococcus pneumoniae Y Streptococcus pyogenes respektive.
Å andra sidan, när det kombineras med antibiotika, är det användbart att isolera fakultativa och strikta anaeroba mikroorganismer av klinisk betydelse från prover med blandad flora..
Slutligen uppfyller kompositionen av tryptikaseinsoyagar och dess prestanda de krav som fastställts av de olika farmakopéerna (europeiska, japanska och nordamerikanska)..
Artikelindex
För att bakterier ska kunna utvecklas korrekt är det nödvändigt med energitillförsel, såsom aminosyror, vitaminer, puriska och pyrimidiska baser..
I denna mening tillhandahåller triptein och sojapepton dessa näringsämnen till mikroorganismer, vilket möjliggör deras fullständiga utveckling. För snabba bakterier är det dock nödvändigt att komplettera denna agar med defibrinerat blod eller uppvärmt blod för att öka dess anrikning..
Å andra sidan, om antibiotika tillsätts till mediet, blir det ett selektivt medium. Du kan också lägga till 0,6% av jästextrakt för att gynna isoleringen av arten av släktet Listeria, medan tillsatsen av cystintellurit Y lammets blod är perfekt för Corynebacterium diphteriae.
Slutligen ger natriumkloriden den osmotiska balansen till mediet och agaren ger den fasta konsistensen..
För att bereda tryptikasin-sojagar måste 40 g av det uttorkade kommersiella mediet vägas i digital skala. Den löser sig i en liter destillerat vatten i en kolv.
Blandningen får vila i 5 minuter och sedan tas den till en värmekälla för att hjälpa till att lösa mediet. Det bör omröras ofta och kokas i 1 eller 2 minuter. Därefter steriliseras mediet i autoklaven vid 121 ° C i 15 minuter.
Låt svalna till 50 ° C och fördela i sterila petriskålar. Låt stelna, vänd upp, ordna i kakor och förvara i kylen.
Mediets slutliga pH måste vara 7,3 ± 0,2.
Det bör noteras att färgen på det uttorkade odlingsmediet är ljusbeige och bör förvaras mellan 10 och 35 ° C, på en torr plats..
Den beredda agaren är för sin del ljus bärnstensfärgad. Beredda tallrikar ska förvaras i kylskåp (2 till 8 ° C) tills de används..
Plattorna måste nå rumstemperatur före användning.
Blodagar framställs genom att tillsätta 5% defibrinerat blod när den tryptiska sojagaren kyls till 50 ° C. Blandningen homogeniseras genom att rotera med mjuka rörelser.
Servera i sterila petriskålar. Den mellersta färgen ska vara körsbärsröd.
För att förbereda den TSA-baserade blodagaren, fortsätt samma som de procedurer som redan beskrivits, men när du lämnar autoklaven, låt den vila tills medietemperaturen är ungefär mellan 56 och 70 ° C. Vid den tiden placeras blodet och blandas tills mediet blir brunt..
Servera i sterila petriskålar. Mediets färg är chokladbrun.
Agarberedningsförfarandet är detsamma som det som beskrivs för plattor, med skillnaden att det istället för att servera mediet på petriskålar, fördelas mellan 10 och 12 ml i rör med bakelitlock innan sterilisering..
Därefter autoklaverades rören vid 121 ° C i 15 minuter. När de lämnar lutar de sig med hjälp av ett stöd och låter dem stelna.
De förberedda kilarna sås efter yta och tjänar till att hålla vissa icke-krävande mikroorganismer livsdugliga under en viss tid..
Tryptikaseinsoyagar används i följande fall:
-Som bas för beredning av den klassiska blodagaren som rutinmässigt används i de flesta laboratorier.
-Isoleringen av snabba bakterier.
-Observera hemolysmönstret.
-Kör diagnostiska tester.
-Som grund för att förbereda speciell blodagar för Corynebacterium diphteriae, med cystintellurit Y lammets blod.
-Som bas för beredning av lammblodagar plus kanamycin-vancomycin för tillväxt av anaerober, särskilt Bacteroides sp.
-För underhåll av icke-krävande stammar (Bacterioteca).
-Aerobiskt mikrobiellt antal i mikrobiell gränsstudie av vatten, miljö, mat och kosmetiska prover.
Prover kan sås direkt på ytan av Trypticasein Soy Agar kompletterat med blod eller andra tillsatser. Det sås av utmattning.
Medan tryptikasein-sojagarplattor utan tillsatser vanligtvis används för att odla mikrobiella stammar (bakterier eller jäst)..
För att kontrollera steriliteten hos de olika medierna som framställts med tryptikasin-sojabasagar, rekommenderas det att göra följande: från varje beredd sats ska 1 eller 2 oinokulerade plattor eller rör inkuberas vid 37 ° C i 24 timmar för att visa deras sterilitet. I alla fall måste den förbli utan tillväxt.
Om förorening upptäcks måste hela satsen kasseras..
Följande bakteriestammar kan användas för att studera hur tryptikaseinsoyagar fungerar korrekt: Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aerugiosa ATCC 9027 och Enterococcus faecalis ATCC 29212.
Stammar såddes och inkuberades aerobt vid 37 ° C under 24 timmar.
I alla fall måste tillväxten vara tillfredsställande.
Svampar som Complex kan också användas Candida albicans ATCC 10231 och Aspergillus niger ATCC 16404. God tillväxt förväntas för båda stammarna.
Följande stammar kan användas för att verifiera att blodagaren fungerar med denna bas. Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 och Streptococcus pneumoniae ATCC 49619.
De ympas och inkuberas vid 37 ° C i mikroaerofilicitet i 24 timmar..
I alla fall måste tillväxten vara tillfredsställande med hänsyn till att i S. pyogenes beta-hemolys (klar halo runt kolonin) bör observeras och i båda stammarna av S. pneumoniae alfahemolys (grönaktig halo runt kolonier) bör observeras.
Ingen har kommenterat den här artikeln än.