De orcein är en naturlig lila färg, extraherad från olika lavar som: orchilla eller urchilla, lichen fruticoso, Rocella tinctoria Y Lecanora parella huvudsakligen. De Rocella tinctoria Den finns på den afrikanska och amerikanska kontinenten, även om den kan ersättas med andra arter som finns i Europa.
Denna fläck har använts i stor utsträckning i cytogenetiska studier sedan antiken. I denna mening introducerades orceinpreparatet som innehåller ättiksyra av LaCourt 1941, varför det ursprungligen kallades LaCourt-tekniken..
På grund av sin enkelhet och låga kostnad har det också använts för tillverkning av lakmus (färgämne extraherat från lavar) och i histologiska studier (färgning av celler och vävnader)..
Flera studier har använt denna fläck i kombination med andra kemikalier, såsom ammoniakpikrokarminat och ättiksyra, för att fläcka elastiska fibrer respektive kromosomer. För närvarande fortsätter orcein att användas i cytogenetiska studier av djur och växter..
Nyligen har Silva et al. 2017 använde framgångsrikt denna fläck för att observera de olika förändringarna som uppträder i de elastiska fibrerna i tummehuden hos chilenska äldre vuxna. Denna studie avslöjade hur fibrerna i tummen förändras med åldrandet.
I denna mening observerades att de elastiska fibrerna var brunsvarta i individer äldre än 80 år; medan de i de yngsta (från 60 år) ses som en rödbrun färg. Cytoplasma och andra cellstrukturer blir gulgröna.
Detta gjorde det möjligt att bekräfta närvaron och tillståndet hos de elastiska fibrerna, vad gäller deras disposition, kvantitet och integritet. Å andra sidan har det också påpekats att orcein är till stor hjälp för att identifiera aneurysmer och diagnostisera arterit, bland andra tillstånd.
Artikelindex
Orcein är en del av oxazin-gruppen av färgämnen och färgningen baseras på dess affinitet för DNA. Färgämnet binder till den negativa laddningen av denna molekyl, representerad av fosfatgruppen. Det är därför kromosomerna är färgade lila.
Resten av cellens strukturer får dock en annan färg. När det gäller elastiska fibrer är de särskilt rödbruna, cellkärnor från blå till mörklila, medan kollagen inte fläckar.
Av denna anledning används orcein för att fläcka kromatin och differentiera kön hos vissa arter av flugor. På samma sätt kan kärnor och vissa leverinslutningar som produceras av hepatit B-antigener färgas..
Orcein-lösningar har specifika funktioner för färgning. Orcein A har funktionen att mjuka upp cellmembranen, orsaka deras död och förlamande processen för deras uppdelning. Under tiden har orcein B ansvaret för att slutföra färgningen genom dess vidhäftning till kromosomerna..
För att framställa en 1% lösning av aceto-orcein löses 2 gram orcein i 45 ml isättika, företrädesvis het, och 55 ml destillerat vatten tillsätts vid rumstemperatur..
Därefter blandas den ständigt för att homogenisera lösningen, för att senare låta den vila tills den svalnar. Slutligen lagras den vid 4 ° C i mörka flaskor. Denna beredning användes av Flores 2012 för att observera mognadsfaserna hos koocyter..
I detta fall placeras exempelvis aceto-orceinlösningen på den vävnad som tidigare fixerats i ättiksyra-etanol i 24 timmar. Denna färgningsprocess utförs i 30 minuter och vävnaden missfärgas därefter..
På samma sätt kan den användas vid identifiering av organeller i flercelliga vävnader. I det här fallet färgas ett utstryk av bukslimhinnan med en droppe av aceto-orceinlösningen, täckglaset placeras på bilden och omedelbart kan cellens kärna med dess underlag observeras.
Dessutom kan orcein framställas med andra kemikalier såsom mjölksyra och propionsyra. För att göra detta löses ett gram orcein i en förblandad lösning vid rumstemperatur av 23 ml mjölksyra och 23 ml propionsyra; fyll upp volymen med destillerat vatten upp till 100 ml.
Med denna laktopropioniska orceinlösning är det möjligt att observera de olika faserna av meiotisk uppdelning av växtceller. I detta fall placeras det för fixerade och hydrolyserade provet i 15 minuter i laktopropioniskt orceinlösning och sedan sprids vävnaden på objektglas..
I Duques 2016-studie om polyetenkromosomer använde han ett preparat av 2 gram orcein utspätt i ättiksyra och 85% mjölksyra, utspädd med en 65% ättiksyra-lösning. Slutligen tittade han på kromosomerna i spottkörtlarna i Drosophila melanogaster.
Det är viktigt att notera att beroende på provet och vad som ska utvärderas bereds lämplig orceinlösning. Således tillsätts till exempel IN saltsyra till orcein A-lösningen för att observera delande celler..
Medan orcein B-lösningen löses i 45% ättiksyra. Denna teknik är en förkortad metod för färgning och används vanligtvis som ett komplement till färgning av kromosomstrukturer..
Sedan århundraden tidigare kan du få lavar i länder på den amerikanska kontinenten som Argentina, såsom: Lecanora, Parmelia Y Umbilicaria, som är bra källor till orcein. Även europeiska områden som Kanarieöarna var då stora producenter av orkillan.
Detta exporterades till andra städer på samma kontinent som Genua och länder som England, medan Holland monopoliserade tillverkningen av lakmus från orkillan. Så senare reducerades denna lav tills den skulle utrotas.
Detta ledde till att orkillan ersattes av andra växter med färgämnen. Emellertid bidrog framväxten av syntetiska färgämnen till att handeln avslutades med denna lavkälla av orcein..
Detta var möjligt tack vare Cocq, som 1812 beskrev syntesen av orcein, då han visste att den syntetiserades av en fenolförening som kallas orcinol. Trots detta är naturligt orcein för närvarande fortfarande det bästa.
Detta kan bero på att orcinol är en mycket starkt luktande förening vars långvariga exponering kan medföra hälsorisker, såsom förlust av förmåga att upptäcka lukt. Dessa skador på hypofysen kan gå från tillfällig till permanent ju större exponering..
Ingen har kommenterat den här artikeln än.