De lentivirus, från latin lenti vilket betyder långsamt, de är virus som kräver lång tid, mellan månader och år, från den första infektionen till sjukdomsutbrottet. Dessa virus tillhör släktet Lentivirus och retrovirus (familj Retroviridae), som har ett RNA-genom som transkriberas till DNA genom omvänd transkriptas (TR).
I naturen finns lentivirus i primater, hovdjur och kattdjur. Till exempel finns det i primater två fylogenetiskt besläktade släkter: simian immunbristvirus (SIV) och humana immunbristvirus (HIV). Båda är de orsakande medlen för förvärvat immunbristsyndrom (AIDS).
Lentivektorer, erhållna från lentivirus, har använts i stor utsträckning för grundforskning inom biologi, funktionell genomik och genterapi..
Artikelindex
Livscykeln för alla retrovirus börjar med kroppens bindning till en specifik receptor på cellytan, följt av internalisering av viruset genom endocytos..
Cykeln fortsätter med avlägsnandet av virusbeläggningen och bildandet av ett viralt nukleoproteinkomplex (VNC), som består av virusgenomet associerat med virala och cellulära proteiner. Kompositionens sammansättning förändras över tiden och är relaterad till omvandlingen, genom TR, av invaderarens genom till en DNA-dubbelhelix.
Integrationen av virusgenomet med cellens kommer att bero på viral genomets förmåga att penetrera värdkärnan. VNC-omorganisation spelar en viktig roll vid import till kärnan, även om viktiga cellulära proteiner också spelar en roll, såsom transportin-SR2 / TNPO3, importin-alfa3 och importin7.
Virala proteiner, såsom integras, och värdcellstranskriptionsfaktorer, såsom LEDCF, är nyckeln till integrationen av virusgenomet.
Den använder värdcellsmaskineriet för att transkribera och översätta virala proteiner och för att montera virioner och släppa dem i extracellulärt utrymme..
Retrovirusgenomet har tre öppna läsramar (MLA) för de olika virala elementen. Till exempel kapsidier och matris (gen gag), enzymer (gen pol) och hölje (gen env).
Konstruktionen av en virusvektor består av eliminering av vissa gener av det vilda viruset, såsom de relaterade till virulens. På detta sätt kan en virusvektor infektera eukaryota celler, retro-transkribera, integreras i genomet hos värdens eukaryota cell och uttrycka transgenen (insatt terapeutisk gen) utan att orsaka sjukdom..
En metod för lentivektorkonstruktion är transient transfektion. Den är baserad på användningen av virala minigenomer (kallade konstruktioner) som bara bär generna av intresse. Transient transfektion består av den oberoende leveransen av konstruktioner.
Vissa retrovektorer har endast huvudelement för sammansättning av viruspartiklar, kallade icke-funktionella retrovektorer. De används för att transfektera förpackningsceller.
Vektorer med en transgen expressionskassett kan infektera, transformera celler (transduktion) och uttrycka transgenen..
Användningen av separata konstruktioner är avsedd att undvika rekombinationshändelser som kan återställa fenotypen av vildtyp..
Lentivektorteknologi används i stor utsträckning i grundläggande biologi och translationella studier för stabil transgenöveruttryck, platsstyrd genredigering, ihållande gendämpning, stamcellsmodifiering, transgen djurgenerering och stamcellsinduktion.
Lentivektorer är lätta att hantera och producera system. De är irreversibelt och säkert integrerade i värdgenomet. De infekterar celler som delar eller inte delar sig.
De visar tropism mot vissa vävnader, vilket underlättar terapi. De uttrycker inte virala proteiner, därför har de låg immunogenicitet. De kan skicka komplexa genetiska element.
I grundforskning har HIV-baserade lentivektorer använts som interferens-RNA-leveranssystem (RNAi) för att eliminera funktionen hos en specifik gen, vilket möjliggör studier av interaktionen med andra olika..
I början av 1990-talet byggdes de första lentivektorerna från HVI-1, vilket är nära besläktat med schimpansen SIV. LVH-1 ansvarar för AIDS över hela världen.
Den första generationen av lentivektorer har en betydande del av HIV-genomet. Inkluderar gener tjej Y pol, och flera ytterligare virala proteiner. Denna generation skapades med två konstruktioner. En av dem, som uttrycker Env, levererar förpackningsfunktionerna. En annan uttrycker alla MLA, med undantag för Env.
Överföringsvektorn består av en expressionskassett markerad med två typer av långa upprepningar (LTR) och gener som är nödvändiga för förpackning och omvänd transkription..
Den andra generationen av förpackningsvektorer saknar majoriteten av tillbehörsgener och behåller Tat och Rev. Dessa gener avlägsnades i den tredje generationen och tillhandahölls av en fjärde konstruktion..
Tredje generationens överföringsvektorer består av två förpackningskonstruktioner. En kodar tjej Y pol. Andra kodar varv. En tredje konstruktion kodar för kuvertet, som härrör från VSV-G. Den som kodar genen av intresse innehåller inaktiverade LTR-lentivirala sekvenser för att förhindra rekombination.
I det senare fallet ökar de transkriptionella regleringselementen prestandan hos överföringsgenerna..
HIV-2-viruset är nära besläktat med den grå magabey SIV (SIVEDER), och ansvarar för aids i Västafrika. Första och andra generationens vektorer har erhållits från detta virus..
Liknar HVI-1, från SIVEDER, Tregenerationsvektorer har konstruerats från EIAV (hästinfektiöst anemivirus), FIV (kattimmunbristvirus) och BIV (bovint immunbristvirus (BIV). Vektorer baserade på EIAV har utvecklats för klinisk användning.
Första och tredje generationens vektorer har konstruerats från caprine artrit-encefalitvirus (CAEV). Medan första generationens vektorer har konstruerats från SIV för den afrikanska gröna apan.
Ingen har kommenterat den här artikeln än.